Anticorpo monoclonale di coniglio contro Acetil-alfa Tubulina K40 (Q71U36) per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della catena Alfa-1A della tubulina

• La tubulina è il componente principale dei microtubuli, che formano una struttura cilindrica a partire da eterodimeri di alfa- e beta-tubulina associati lateralmente. I microtubuli crescono aggiungendo dimeri legati al GTP all'estremità più, dove si forma una calotta stabilizzante. Al di sotto della calotta, l'idrolisi del GTP (EC 3.6.5.-) converte la tubulina in uno stato legato al GDP, rendendola soggetta a depolimerizzazione. Questa instabilità dinamica è fondamentale per la divisione cellulare, il trasporto intracellulare e l'integrità strutturale. Riferimenti correlati: UniProt Q71U36.

• L'alfa-tubulina si localizza prevalentemente nel citoplasma e nel citoscheletro. È anche componente degli assonemi ciliari e flagellari, dove forma il nucleo microtubulare essenziale per la motilità e la segnalazione. Riferimenti correlati: UniProt Q71U36.

• L'espressione è particolarmente elevata nel tessuto cerebrale fetale, suggerendo un ruolo critico nello sviluppo neuronale precoce e nella formazione degli assoni. Riferimenti correlati: PMID:17584854.

• L'anticorpo riconosce specificamente l'alfa-tubulina acetilata nella lisina 40 (K40). L'acetilazione in questo residuo è un marcatore di microtubuli stabili, specialmente nei neuroni, nelle ciglia e nei flagelli. L'alfa-tubulina subisce anche altre modifiche post-traduzionali come la poliglutamilazione, la fosforilazione e la nitrotirosina, che regolano la funzione e le interazioni dei microtubuli. Riferimenti correlati: PMID:24906155; PMID:32747782; PMID:10339593.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico acetilato intorno alla K40; pertanto, si prevede che l'anticorpo rilevi l'alfa-tubulina acetilata in modo preferenziale rispetto alla forma non acetilata. Si consiglia di utilizzare inibitori delle acetilasi o trattamenti di controllo per convalidare i segnali specifici per l'acetilazione.
• Per il western blotting è attesa una banda principale a ~50 kDa. Utilizzare campioni freschi con inibitori di proteasi ed evitare molteplici cicli di congelamento-scongelamento per preservare i marcati di acetilazione labili.
• Nell'immunohistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare il recupero dell'antigene e la fissazione (ad esempio con paraformaldeide al 4%) per mantenere la disponibilità dell'epitopo. Includere controlli di isotipo e controlli senza anticorpo primario per confermare la specificità della colorazione.
• Dato l'alta espressione nel cervello fetale, il tessuto cerebrale o le linee cellulari neuronali possono essere utilizzati come controlli positivi. La reattività crociata con topo e ratto consente studi traslazionali e preclinici.
• Per l'ELISA, rivestire la piastra con peptide acetilato o proteina ricombinante per valutare il legame. Abbinare con peptide non acetilato come controllo negativo per garantire la specificità dell'epitopo.

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