Anticorpo policlonale coniglio Acetil-Istona H2A (K5) (P04908/P0C0S8) per WB, IF/ICC, ELISA

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'istona H2A

• L'istona H2A è un componente fondamentale del nucleosoma, che avvolge e compatta il DNA nella cromatina. Questo processo limita l'accessibilità del DNA e svolge un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica.
• La localizzazione subcellulare di H2A è principalmente nel nucleo e nei cromosomi.
• L'istona H2A è soggetta a estese modifiche post-traduzionali (PTM) sulla sua coda N-terminale, tra cui acetilazione, metilazione, fosforilazione e ubiquitinazione. Queste modifiche costituiscono il "codice dell'istone" e regolano la dinamica della cromatina.
• L'acetilazione della lisina 5 (H2AK5ac) è un marcatore epigenetico chiave associato alla trascrizione attiva e alla cromatina aperta. Questo anticorpo è stato prodotto contro un peptide acetilato sintetico intorno alla K5 e riconosce specificamente la forma acetilata.
• Più geni codificano varianti di H2A (ad esempio H2AC4, H2AC8, H2AC11, H2AC15, H2AC16, H2AC17), che sono altamente conservate tra le specie. La sequenza dell'immunogeno è derivata da H2A umano e si prevede una reattività crociata con ortologhi grazie all'elevata omologia di sequenza.

Riferimenti correlati: UniProt P04908 e UniProt P0C0S8 annotano in modo completo le funzioni e le modifiche dell'istona H2A.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide acetilato sintetico intorno alla K5. Per confermare la specificità per la forma acetilata, si consiglia di utilizzare il blocco con peptide non acetilato o di confrontare i segnali di cellule trattate con inibitori delle istone deacetilasi (ad esempio tricostatina A, sodio butirrato) con i controlli non trattati.
• Nel western blot (WB) è prevista una banda a circa 14 kDa per l'istona H2A. L'intensità del segnale dipenderà dallo stato di acetilazione del campione.
• Per l'immunofluorescenza/ICC, ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione. La fissazione con metanolo o la permeabilizzazione con Triton X-100 sono generalmente efficaci per target istonici nucleari.
• Questo anticorpo è stato validato per ELISA e può essere adatto per saggi quantitativi se abbinato a standard appropriati.
• La reattività crociata riportata include uomo, topo e ratto, e si prevede una reattività verso un'ampia gamma di altre specie basata sull'omologia di sequenza. Convalidare la reattività nel vostro sistema modello specifico se non è stata testata in precedenza.
• Essendo un anticorpo policlonale, possono verificarsi variazioni da lotto a lotto. Si raccomanda la titolazione e l'ottimizzazione per ogni applicazione e tipo di campione.

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