Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Acetil-Istone H2B-K20 (P62807/Q16778) per WB, ELISA, ChIP

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H2B

L'Istone H2B è un componente fondamentale del nucleosoma, l'unità ripetitiva di base della cromatina. Insieme agli istoni H2A, H3 e H4, avvolge e compatta il DNA, regolando così l'accessibilità del DNA ai macchinari cellulari. L'Istone H2B svolge un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica. L'accessibilità del DNA è regolata da un complesso insieme di modificazioni post-traduzionali (PTM), note collettivamente come codice istonico, che include acetilazione, metilazione, fosforilazione e altre. Le due principali varianti umane di H2B (SWISS P62807 e Q16778) condividono sequenze quasi identiche e sono codificate da diversi cluster genici. Riferimenti correlati: UniProtKB P62807, UniProtKB Q16778.

Oltre ai suoi ruoli nucleari, l'Istone H2B mostra un'ampia attività antibatterica e può contribuire alla barriera antimicrobica dell'epitelio del colon e all'attività battericida del liquido amniotico.

L'Istone H2B si localizza principalmente nel nucleo ed è strettamente associata ai cromosomi. È ampiamente espressa in tutti i tessuti, riflettendo il suo ruolo fondamentale nell'organizzazione del genoma. Riferimenti correlati: UniProtKB P62807, UniProtKB Q16778.

L'acetilazione alla lisina 20 (K20) è una specifica PTM che può influenzare la struttura della cromatina e l'espressione genica. Studi di spettrometria di massa hanno identificato numerosi siti di acetilazione su H2B, incluso K20 (riportato come K21 in alcuni allineamenti). Questo anticorpo riconosce specificamente la forma acetilata di K20, consentendo il monitoraggio preciso di questa modificazione nella biologia della cromatina e nella ricerca epigenetica. Riferimenti correlati: PMID:16283522, PMID:16627869.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo policlonale è stato generato contro un peptide sintetico acetilato corrispondente alla lisina 20 dell'Istone H2B umano. Si prevede che riconosca specificamente H2B‑K20 acetilato nei saggi pertinenti.
• Per il Western blotting (WB), considerare l'uso di estratti nucleari o lisati cellulari totali da campioni umani, di topo o di ratto. Il peso molecolare previsto è di circa 14 kDa. Una diluizione iniziale raccomandata dovrebbe essere determinata empiricamente e validata nel sistema di campioni rilevante.
• In ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento. Accoppiare con un appropriato anticorpo anti-H2B totale per la normalizzazione. Validare la specificità utilizzando peptidi competitori acetilati e non acetilati.
• Per la immunoprecipitazione della cromatina (ChIP), ottimizzare le condizioni di reticolazione e frammentazione della cromatina per il proprio tipo cellulare. Includere un anticorpo anti-Istone H3 o anti-H2B totale come controllo positivo e un controllo isotipo IgG per valutare il legame aspecifico.
• Altre applicazioni potrebbero essere possibili; utilizzare sempre controlli appropriati e validare le prestazioni nel proprio contesto sperimentale.

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