Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Acetil-Istone H2B-K5 (P62807/Q16778) per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H2B

L'istone H2B è un componente centrale del nucleosoma, l'unità fondamentale della cromatina. Insieme agli istoni H2A, H3 e H4, avvolge e compatta il DNA, regolando così l'accessibilità del DNA. Ciò svolge un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica. Riferimenti correlati: UniProtKB P62807, UniProtKB Q16778

Le modificazioni post-traduzionali (PTM) degli istoni, inclusa l'acetilazione, la metilazione, la fosforilazione e l'ubiquitinazione, costituiscono il "codice istonico" che determina la dinamica della cromatina e l'espressione genica. L'acetilazione di specifici residui di lisina, come K5 sull'istone H2B, neutralizza la carica positiva della coda istonica, rilassando la struttura della cromatina e facilitando l'attivazione trascrizionale. Questa modificazione è regolata dinamicamente dalle istone acetiltransferasi (HAT) e dalle deacetilasi (HDAC). Riferimenti correlati: PMID:16283522, PMID:16627869

L'istone H2B è localizzato prevalentemente nel nucleo, associato ai cromosomi. È espresso in molteplici forme varianti, codificate da diversi cluster genici, ma condivide un'elevata conservazione della sequenza tra le specie. Oltre ai suoi ruoli nucleari, H2B mostra un'ampia attività antibatterica e può contribuire alla barriera antimicrobica dell'epitelio del colon e del liquido amniotico. Riferimenti correlati: UniProtKB P62807, UniProtKB Q16778

Gli accessi SWISS P62807 (Istone H2B tipo 1-C/E/F/G/I) e Q16778 (Istone H2B tipo 2-E) rappresentano due delle diverse varianti dell'istone H2B umano, tutte condividono il sito di acetilazione K5 conservato bersagliato da questo anticorpo.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è stato generato contro un peptide sintetico acetilato corrispondente a K5 dell'istone H2B umano. Si prevede che riconosca specificamente la forma acetilata; convalidare nel vostro sistema di campionamento utilizzando controlli positivi e negativi appropriati (ad es., campioni trattati con inibitori delle HDAC vs. non trattati).
• Per il Western blot (WB), considerare l'uso di un lisato arricchito nucleare e condizioni SDS-PAGE standard. Dovrebbe essere rilevata una banda intorno a 14 kDa (il peso molecolare approssimativo dell'istone H2B).
• Per IHC-P, IF/ICC ed ELISA, ottimizzare la diluizione dell'anticorpo e includere, se necessario, passaggi di recupero dell'antigene. Poiché l'immunogeno è un peptide corto, il recupero dell'antigene può essere critico per l'IHC.
• Si prevede che l'anticorpo abbia un'ampia reattività crociata con umano, topo, ratto e altre specie a causa dell'elevata conservazione della sequenza intorno a K5. Tuttavia, la reattività crociata dovrebbe essere confermata sperimentalmente in ciascuna specie di interesse.

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