Acetyl-Histone H3-K14 Anticorpo Monoclonale Coniglio (Q16695 / P68431) per WB, DB, ChIP, ELISA

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H3

• L'istone H3 è un componente principale del nucleosoma, che avvolge e compatta il DNA in cromatina, regolando così l'accessibilità del DNA per la trascrizione, la replicazione, la riparazione e il mantenimento della stabilità cromosomica. Questo ruolo è essenziale per tutti i processi basati su DNA. Riferimenti correlati: PMID:16185088, PMID:16267050
• Le isoforme H3 H3.1 (codificate da multiple copie geniche, es. HIST1H3A-J) e H3.1t (specifiche del testicolo, codificate da HIST3H3) condividono lo stesso dominio di ripiegamento istonico e sono localizzate principalmente nel nucleo e nei cromosomi. H3.1t è espressa specificamente nelle cellule testicolari, mentre l'H3.1 canonico è ampiamente espresso.
• Le modifiche post-traduzionali degli istoni, in particolare acetilazione, metilazione, fosforilazione e altre, costituiscono il "codice istonico" che governa la dinamica della cromatina. L'acetilazione alla lisina 14 dell'istone H3 (H3K14ac) è un marchio distintivo della cromatina attiva ed è riconosciuta da proteine contenenti domini bromo. Riferimenti correlati: PMID:16267050, PMID:16627869
• L'anticorpo si specificamente target sulla forma acetilata del K14, consentendo lo studio della regolazione trascrizionale mediata da H3K14ac e dei marchi epigenetici.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide acetilato sintetico attorno al K14 dell'istone H3 umano. Quando si progettano anticorpi simili, considerare l'uso di un peptide acetilato per garantire la specificità per la forma acetilata.
• Per il Western blotting (WB), validare l'anticorpo utilizzando lisati cellulari totali di cellule umane, di topo o di ratto. Il trattamento con inibitori delle istone deacetilasi (es. TSA o butirrato di sodio) può potenziare il segnale e confermare il rilevamento dipendente dall'acetilazione.
• Nella immunoprecipitazione della cromatina (ChIP), i protocolli standard di cross-linking e shearing sono adatti. Si raccomanda l'inclusione di controlli appropriati (es. competizione con peptide non acetilato, IgG di coniglio normale) per garantire la specificità di grado ChIP.
• Per le applicazioni ELISA e dot blot (DB), utilizzare peptidi H3K14 acetilati rispetto a non acetilati come controlli positivi e negativi per verificare il legame.
• È stata osservata reattività crociata con topo e ratto; tuttavia, gli utenti dovrebbero validare l'anticorpo nel loro specifico sistema sperimentale, poiché l'espressione del bersaglio e i livelli di modifica possono variare.

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