Anticorpo monoclonale di coniglio Acetil-Istone H3-K27 (Q16695 / P68431) per WB, IHC-P, ChIP

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'istone H3

L'istone H3 è un componente centrale del nucleosoma, che avvolge e compatta il DNA nella cromatina, regolando così l'accessibilità del DNA ai macchinari cellulari. Gli istoni svolgono un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica. Un complesso insieme di modifiche post-traduzionali (PTM) sugli istoni, noto collettivamente come codice istonico, controlla dinamicamente la struttura e la funzione della cromatina.
Riferimenti correlati:
PMID:16627869
PMID:17194708

L'istone H3 ha diverse varianti; H3.1 (codificato da geni come H3C1-H3C12, UniProt P68431) è la forma canonica dipendente dalla replicazione espressa durante tutto il ciclo cellulare, mentre H3.1t (H3-4, UniProt Q16695) è una variante specifica del testicolo. Entrambe si localizzano nel nucleo e sono parti integranti dei cromosomi.
Riferimenti correlati:
UniProt Q16695
UniProt P68431

L'acetilazione della lisina 27 dell'istone H3 (H3K27ac) è un marcatore ben caratterizzato di enhancer e promotori attivi, che li distingue dagli elementi regolatori in equilibrio o inattivi. Questa modificazione, catalizzata da istone acetiltransferasi come p300/CBP, promuove una conformazione di cromatina aperta e facilita l'attivazione trascrizionale. La disregolazione dell'acetilazione di H3K27 è stata implicata nel cancro e in altre patologie.
Riferimenti correlati:
PMID:16627869
PMID:17194708

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Durante la rilevazione dell'acetilazione, aggiungere inibitori delle deacetilasi (ad esempio butirrato di sodio, TSA) ai buffer di lisì per preservare i livelli endogeni di acetilazione.
• Utilizzare lisati di cellule intere di HeLa, HEK293 o altre linee cellulari appropriate come controlli positivi; i campioni indotti o trattati possono mostrare un segnale H3K27ac potenziato.
• Per i saggi ChIP, assicurarsi che l'anticorpo arricchisca specificamente la cromatina marcata con H3K27ac; considerare le condizioni di reticolazione e l'ottimizzazione della sonicazione.
• Confermare la specificità dell'anticorpo tramite un esperimento di blocco con peptide acetilato o confrontando i segnali con un anticorpo pan-H3.
• Questo anticorpo è adatto per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA, DB e ChIP; convalidare le prestazioni nel sistema di campioni pertinente per ogni applicazione.

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