Anticorpo policlonale coniglio anti-Acetil-Istona H3 (K36) (Q16695/P68431) per WB e ELISA

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'istona H3

L'istona H3 è un componente principale del nucleosoma, avvolgendo e compattando il DNA nella cromatina, svolgendo così un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica. L'accessibilità del DNA è regolata dinamicamente da modificazioni post-traduzionali (PTM), comunemente indicate come "codice delle istone". Riferimenti correlati: UniProtKB P68431

L'acetilazione alla lisina 36 (K36, corrispondente alla posizione 37 nella proteina H3 matura) è una modifica ben caratterizzata associata alla cromatina attivamente trascritta. Questo marcatore di acetilazione viene depositato dinamicamente dalle acetiltransferasi istoniche e rimosso dalle deacetilasi, contribuendo alla regolazione dell'espressione genica e della struttura della cromatina. Riferimenti correlati: PMID:17189264, PMID:17194708

L'istona canonica H3.1 (codificata da più geni come H3C1–H3C12) è espressa ubiquitariamente, mentre la variante specifica dei testicoli H3.1t (H3-4) è limitata alle cellule testicolari. L'anticorpo riconosce la K36 acetilata attraverso più varianti H3 grazie alla conservazione della sequenza attorno al sito di modifica. Riferimenti correlati: UniProtKB Q16695

La localizzazione subcellulare dell'istona H3 è nucleare, strettamente associata al DNA cromosomico durante tutto il ciclo cellulare. L'istona H3 fosforilata è un marcatore ampiamente utilizzato della condensazione cromosomica durante la mitosi. Riferimenti correlati: UniProtKB P68431

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide acetilato sintetico che copre la K36 dell'istona H3 umana. Per confermare la specificità dell'anticorpo, considerare di eseguire saggi di blocco peptidico utilizzando il peptide acetilato rispetto a quello non acetilato.
• Nelle applicazioni di Western blot (WB), validare l'anticorpo nei sistemi di campione pertinenti (es. lisati cellulari totali di HeLa) e utilizzare controlli appropriati come istoni estratti da cellule trattate con inibitori delle HDAC per arricchire l'acetilazione.
• Per ELISA, il peptide acetilato può essere utilizzato come antigene di rivestimento; l'attività deve essere verificata rispetto al peptide non modificato per garantire un legame specifico per la modifica.
• Questo anticorpo mostra un'ampia reattività crociata tra le specie (Umano, Mouse, Ratto e ampia gamma prevista), ma è consigliabile verificare inizialmente la reattività nella specie specifica e nel tessuto di interesse.
• A causa della natura policlonale, la coerenza tra lotti deve essere monitorata; includere uno standard di controllo positivo in ogni esperimento.

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