Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Acetil-Istone H3-K4 (Q16695/P68431) per WB, IP, IHC, ChIP, ELISA

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H3

L'Istone H3 è un componente centrale del nucleosoma, l'unità ripetitiva fondamentale della cromatina. Insieme agli istoni H2A, H2B e H4, forma un ottamero attorno al quale si avvolgono circa 147 bp di DNA, facilitando la compattazione e l'organizzazione del DNA all'interno del nucleo. Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431

I nucleosomi regolano l'accessibilità del DNA ai macchinari cellulari, svolgendo quindi un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica. Questa funzione regolatoria è mediata da un complesso insieme di modificazioni post-traduzionali (PTM) sugli istoni, collettivamente indicate come 'codice istonico'. Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431

L'acetilazione è una delle PTM più ampiamente studiate ed è generalmente associata a uno stato di cromatina aperto e trascrizionalmente attivo. L'acetilazione di specifici residui di lisina, inclusa la lisina 4 (H3K4ac), svolge un ruolo critico nella regolazione epigenetica e nell'espressione genica. Riferimenti correlati: UniProt P68431 (annotazioni di acetilazione)

Nei mammiferi esistono molteplici forme varianti dell'istone H3. La forma canonica H3.1 (codificata da geni multipli come quelli sotto l'accessione P68431) è espressa durante tutto il ciclo cellulare, mentre la variante H3.1t (accessione Q16695) è espressa nelle cellule testicolari. L'epitopo per questo anticorpo si trova in una regione altamente conservata della coda N-terminale, consentendo un'ampia reattività crociata tra specie. Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431

L'Istone H3 è localizzata nel nucleo ed è strettamente associata al DNA cromosomico. La sua presenza nelle regioni attivamente trascritte e negli elementi regolatori sottolinea l'importanza di studiare modificazioni specifiche del sito come l'acetilazione di H3K4. Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico acetilato che circonda la lisina 4 dell'Istone H3 umano, progettato per riconoscere specificamente la forma acetilata di H3K4.
• Le applicazioni consigliate includono Western blot (rilevamento di una banda a ~15 kDa), immunoprecipitazione, immunofluorescenza/ICC, immunoistochimica (paraffina), dot blot, immunoprecipitazione della cromatina ed ELISA.
• Per il ChIP, considerare l'ottimizzazione delle condizioni di reticolazione e sonicazione; la specificità dell'anticorpo per l'epitopo acetilato lo rende adatto per catturare regioni di cromatina attivamente trascritte.
• Quando si utilizza per IP o IF, validare l'anticorpo nel proprio sistema di campioni specifico e includere controlli positivi e negativi appropriati (ad esempio, trattamento con inibitori delle istone deacetilasi per aumentare i livelli di acetilazione).
• A causa dell'elevata conservazione tra le specie, è prevista reattività crociata con umano, topo, ratto e altre specie (ampia gamma prevista); verificare in specie non tipiche se necessario.
• Per applicazioni critiche, può essere considerata la pre-adsorbimento con peptide non acetilato per confermare la specificità.

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