Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Acetil-Istone H3 (K4/K9/K14/K18/K23/K27) (Q16695 / P68431) per WB, ELISA

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Acetil-Istone H3

L'istone H3 è un componente centrale del nucleosoma, l'unità ripetitiva fondamentale della cromatina. I nucleosomi avvolgono e compattano il DNA, regolando così l'accesso al materiale genetico. Questo impacchettamento dinamico svolge un ruolo centrale nella trascrizione, replicazione e riparazione del DNA, e nella stabilità cromosomica.

Riferimenti correlati: UniProt Q16695 / P68431

Le modifiche post-traduzionali degli istoni, in particolare l'acetilazione di specifici residui di lisina N-terminali, costituiscono una parte critica del "codice degli istoni" che governa la struttura e la funzione della cromatina. L'acetilazione ai residui K4, K9, K14, K18, K23 e K27 dell'Istone H3 è associata all'attivazione trascrizionale, poiché neutralizza la carica positiva delle lisine, indebolendo le interazioni istoni-DNA e promuovendo una conformazione di cromatina aperta. Queste modifiche sono scritte dalle istone acetiltransferasi (HAT) e cancellate dalle istone deacetilasi (HDAC), e fungono da siti di ancoraggio per varie proteine effettrici.

Riferimenti correlati: Acetilazione K4 (K5): PMID:17194708, Acetilazione K9 (K10): PMID:16185088, PMID:16267050, Acetilazione K14 (K15): PMID:16185088, PMID:16267050, Acetilazione K18 (K19): PMID:16267050, PMID:16627869, Acetilazione K23 (K24): PMID:16267050, PMID:16457588, Acetilazione K27 (K28): PMID:16627869, PMID:17194708

L'istone H3 è localizzato prevalentemente nel nucleo, dove si associa al DNA cromosomico. La variante canonica H3.1 (P68431) è espressa nella maggior parte delle cellule somatiche, mentre la variante tessuto-specifica H3.1t (Q16695) è ristretta alle cellule testicolari. L'ampia cross-reattività prevista per l'anticorpo copre entrambe le varianti.

Riferimenti correlati: Localizzazione subcellulare: UniProt Q16695 / P68431, Specificità tissutale: Q16695

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno era un peptide sintetico acetilato contenente le modifiche K4 e K27; l'anticorpo potrebbe riconoscere preferenzialmente questi epitopi, ma è possibile un riconoscimento più ampio di lisine similmente acetilate. Si consiglia di convalidare la specificità utilizzando controlli con peptide mutato o non modificato.
• Per il Western blot, sono raccomandati istoni estratti con acido o estratti nucleari per arricchire il bersaglio; la dimensione attesa della banda è di circa 15 kDa.
• In ELISA, il rivestimento con peptidi acetilati o preparazioni di istoni nativi può aiutare a confermare la reattività; titolare l'anticorpo e il sistema di rilevamento per un rapporto segnale-rumore ottimale.
• L'istone H3 è altamente conservato tra le specie; si prevede che l'anticorpo reagisca con un'ampia gamma di organismi, ma si consiglia la convalida nel sistema campione dell'utente.
• Per mantenere la stabilità, aliquottare e conservare a -20°C o -80°C dopo la ricostituzione, ed evitare ripetuti cicli di congelamento-scongelamento.

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