Anticorpo monoclonale di coniglio Acetil-Histone H3-K56 (Q16695 / P68431) per ChIP, WB, IF

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'istone H3

L'istone H3 è un componente centrale del nucleosoma, l'unità ripetitiva fondamentale della cromatina. Insieme agli istoni H2A, H2B e H4 forma un ottamero attorno al quale si avvolge il DNA, compattando il genoma e regolando l'accesso per trascrizione, replicazione e riparazione. Questa architettura è alla base della stabilità cromosomica e del controllo dinamico dell'espressione genica.

Riferimenti correlati:

• UniProtKB Q16695

• UniProtKB P68431

• L'istone H3 è soggetto a una vasta gamma di modifiche post-traduzionali (PTM), spesso definite "codice degli istoni". Queste includono acetilazione, metilazione, fosforilazione, citrullinazione e molte altre, che modulano collettivamente la struttura della cromatina e il reclutamento di proteine effettrici. L'acetilazione alla lisina 56 (K56) è un marcatore particolarmente rilevante implicato nell'assemblaggio del nucleosoma, nella risposta al danno del DNA e nella regolazione trascrizionale.

Riferimenti correlati:

• PMID:17194708

• PMID:19608861

• L'istone H3 si localizza esclusivamente nel nucleo e si associa ai cromosomi durante la divisione cellulare. La variante canonica H3.1 (codificata da più geni tra cui HIST1H3A, SWISS P68431) è espressa in modo dipendente dalla replicazione durante tutto il ciclo cellulare, mentre la variante H3.1t (Q16695) è specifica del testicolo e contribuisce all'organizzazione della cromatina nelle cellule germinali maschili.

Riferimenti correlati:

• UniProtKB Q16695

• UniProtKB P68431

• Gli anticorpi contro la K56 acetilata sono strumenti preziosi per studiare l'assemblaggio della cromatina accoppiato alla replicazione del DNA, le vie di stress genotossico e la dinamica dell'ereditarietà epigenetica. L'immunogeno acetil-specifico usato per generare questo anticorpo garantisce un'elevata selettività per la forma modificata rispetto all'H3 non modificato.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente alla K56 acetilata dell'istone H3 umano. Questo progetto dovrebbe conferire un'elevata specificità; tuttavia, i ricercatori possono valutare di verificare la selettività confrontando i segnali tra controlli bloccati con peptide acetilato e non acetilato nei loro sistemi sperimentali.
• L'anticorpo è consigliato per un'ampia gamma di applicazioni tra cui ChIP-seq, CUT&Tag e IF. Per i saggi basati sulla cromatina, ottimizzare le condizioni di reticolazione e sonicazione per preservare l'epitopo di acetilazione K56. Nell'immunofluorescenza è previsto un pattern di colorazione nucleare.
• Il peso proteico previsto è di 15 kDa. Quando si esegue la WB, includere marcatori di peso molecolare appropriati e valutare l'utilizzo di un protocollo di estrazione degli istoni per arricchire le proteine nucleari.
• Sebbene la reattività crociata sia prevista per un ampio spettro di specie, è consigliabile convalidare le prestazioni in campioni non umani tramite allineamento di sequenza intorno al sito di acetilazione o testando il materiale biologico pertinente.

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