Acetyl-Histone H3 K9 (Q16695/P68431) Anticorpo Policlonale Coniglio - WB IP IF IHC ChIP ELISA

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H3

L'istone H3 è un componente principale del nucleosoma, l'unità fondamentale ripetuta della cromatina. I nucleosomi avvolgono e compattano il DNA, regolando così l'accessibilità alla macchinaria trascrizionale. Le istoni, inclusa H3, svolgono ruoli centrali nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica. L'accessibilità del DNA è regolata dinamicamente attraverso una varietà di modificazioni post-traduzionali (PTM) sulle istoni, collettivamente note come "codice delle istoni", e il rimodellamento dei nucleosomi.

L'istone H3 si localizza nel nucleo e nei cromosomi. Nei umani esistono due principali isoforme: l'istone canonico dipendente dalla replicazione H3.1 (codificato da più geni come H3C1/HIST1H3A, H3C2/HIST1H3B, ecc., UniProt: P68431) e l'istone indipendente dalla replicazione, specifico del testicolo H3.1t (codificato da H3-4/HIST3H3, UniProt: Q16695). Mentre H3.1 è ampiamente espresso, l'espressione di H3.1t è limitata alle cellule testicolari.

Una caratteristica distintiva dell'istone H3 è la sua vasta gamma di PTM, inclusa acetilazione, metilazione, fosforilazione, citrullinazione e altre. L'acetilazione alla lisina 9 (K9) di H3 è un marchio epigenetico ben caratterizzato generalmente associato all'eucromatina trascrizionalmente attiva e alle regioni di cromatina aperta. Questa modifica è regolata dinamicamente dalle istone acetiltransferasi (HAT) e dalle deacetilasi (HDAC), contribuendo alla regolazione genica, al controllo del ciclo cellulare e allo sviluppo. L'acetilazione a molteplici altri residui di lisina su H3 è stata verificata sperimentalmente e condivide ruoli regolatori simili.

Riferimenti correlati: PMID:16267050, PMID:16627869, PMID:16185088

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli aminoacidi 1-100 dell'istone H3 umano, il che può portare al riconoscimento di multiple varianti H3. Si consiglia di verificare la specificità per l'isoforma bersaglio nel proprio sistema di campionamento.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda a circa 15 kDa. Si raccomandano protocolli di estrazione delle istoni e controlli di carico appropriati per risultati ottimali.
• Per le applicazioni IP e ChIP, validare l'anticorpo nelle proprie condizioni specifiche. Nel ChIP-seq, includere il DNA di input e i controlli IgG non specifici, e ottimizzare il cross-linking se necessario.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), i metodi di fissazione e permeabilizzazione possono influenzare l'accessibilità dell'epitopo; testare diversi protocolli per ottenere il miglior rapporto segnale/rumore.
• L'anticorpo ha una prevista ampia reattività crociata (umano, topo, ratto, altri), ma confermare sempre le prestazioni nel proprio setup sperimentale.

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