Acetyl-Histone H4-K12 Rabbit mAb (P62805) per ChIP, WB e IHC-P | CamelBio

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istona H4

L'istona H4 è una delle quattro proteine istone core che formano il nucleosoma, l'unità fondamentale ripetuta della cromatina. Insieme agli istoni H2A, H2B e H3, avvolge e compatta il DNA, regolando così l'accesso al materiale genetico. Questa compattazione è essenziale per una corretta segregazione cromosomica durante la divisione cellulare e per l'organizzazione spaziale del genoma all'interno del nucleo. L'istona H4 svolge un ruolo centrale nei processi guidati dal DNA come la trascrizione, la replicazione e la riparazione, controllando l'accessibilità del DNA attraverso una complessa serie di modifiche post-traduzionali, collettivamente note come codice degli istoni.
Riferimenti correlati: UniProt P62805

La coda N-terminale dell'istona H4 è soggetta a estese modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, metilazione, fosforilazione e altre. L'acetilazione della lisina 12 (H4K12ac; corrispondente al residuo 13 della proteina matura) è una marca istonica ben caratterizzata associata alla cromatina trascrizionalmente attiva ed è riconosciuta da varie proteine contenenti domini bromo. Questa modifica è regolata dinamicamente da istone acetiltransferasi (HAT) e deacetilasi (HDAC), e la sua presenza in specifici loci genomici correla con l'attivazione genica e gli stati di cromatina aperta.
Riferimenti correlati: PMID:17967882, PMID:2474456, PMID:7664735

L'istona H4 è localizzata prevalentemente nel nucleo ed è strettamente associata al DNA cromosomico. In certi contesti, come durante la spermatogenesi, l'istone H4 acetilata diventa arricchita nel nucleo degli spermatidi in allungamento, suggerendo un ruolo nel rimodellamento della cromatina durante lo sviluppo delle cellule germinali. La proteina è espressa ubiquitariamente nei tessuti, riflettendo il suo ruolo fondamentale nella struttura della cromatina.
Riferimenti correlati: UniProt P62805

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per gli esperimenti di immunoprecipitazione della cromatina (ChIP), considerare l'ottimizzazione del tempo di cross-linking e delle condizioni di sonicazione per frammentare la cromatina in un intervallo di dimensioni di 200–500 bp, poiché le interazioni istone-DNA sono robuste.
• Quando si esegue il western blot, l'arricchimento degli istoni mediante estrazione acida o kit di purificazione degli istoni può migliorare il segnale. Mantenere i campioni sul ghiaccio e aggiungere appropriati inibitori delle istone deacetilasi se è necessario preservare i livelli di acetilazione.
• Questo anticorpo è previsto avere un'ampia reattività crociata tra le specie grazie alla sequenza altamente conservata dell'istona H4. Validare l'anticorpo nella specie e nel sistema tissutale di interesse, poiché i pattern di acetilazione possono variare.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), si raccomanda il recupero dell'antigene con tampone citrato e un'attenta ottimizzazione della concentrazione dell'anticorpo per ottenere una colorazione nucleare specifica.
• Il formato monoclonale di coniglio fornisce prestazioni coerenti da lotto a lotto e alta specificità, rendendolo adatto per confronti multi-campione e saggi quantitativi.

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