Anticorpo monoclonale coniglio Acetil-Istona H4-K16 (P62805) per applicazioni WB, ChIP e IHC-P

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'istona H4

• Componente principale del nucleosoma: L'istona H4 è un elemento fondamentale del nucleosoma, l'unità di ripetizione di base della cromatina. Avvolge e compatta il DNA, regolando così l'accesso al materiale genetico e svolgendo un ruolo centrale nella trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione e nella stabilità cromosomica. Lo stato dinamico della cromatina è governato da una complessa serie di modificazioni post-traduzionali (il "codice delle istone") e dal rimodellamento dei nucleosomi. Riferimenti correlati: UniProt P62805

• Localizzazione subcellulare: L'istona H4 è localizzata prevalentemente nel nucleo ed è un costituente principale dei cromosomi. Le forme acetilate, come quelle che coinvolgono K16, si trovano in contesti nucleari specifici, inclusi i nuclei degli spermatidi in allungamento. Riferimenti correlati: UniProt P62805

• Modificazioni post-traduzionali e acetilazione K16: L'istona H4 è pesantemente modificata, specialmente ai residui di lisina. L'acetilazione della lisina 16 (K16, corrispondente alla posizione 17 nella sequenza UniProt processata) è un marchio epigenetico critico. Questa modifica è associata alla cromatina aperta e a regioni trascrizionalmente attive. È regolata dinamicamente da istone acetiltransferasi (HAT) e deacetilasi (HDAC), ed è riconosciuta da proteine contenenti domini bromo per modulare l'espressione genica. Riferimenti correlati: PMID:17967882, PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:19608861

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno per questo anticorpo è un peptide acetilato sintetico attorno a K16 dell'istona H4 umana, garantendo la specificità per la forma acetilata. Includere sempre controlli appropriati (es. competizione con peptide non acetilato o anticorpo totale Istona H4) per confermare la specificità nel proprio sistema sperimentale.
• Per il Western blotting (WB), è prevista una singola banda a circa 11 kDa. Considerare l'ottimizzazione delle quantità di carico e delle condizioni di blocco per ridurre il legame aspecifico.
• Nella immunoprecipitazione della cromatina (ChIP), le condizioni di cross-linking e di frammentazione della cromatina dovrebbero essere ottimizzate attentamente. L'anticorpo potrebbe essere adatto sia per ChIP nativa che cross-linkata; validare il recupero di regioni genomiche note acetilate a K16.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), i metodi di recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo richiederanno una determinazione empirica. L'ampia reattività crociata prevista (umano, topo, ratto e altri) rende questo anticorpo uno strumento versatile, ma i pattern di colorazione dovrebbero essere verificati con appropriati controlli biologici.
• L'alto grado di conservazione evolutiva dell'istona H4 è alla base dell'ampia reattività di specie prevista. Tuttavia, raccomandiamo di validare l'anticorpo nella vostra specifica specie e modello tissutale a causa di potenziali variazioni nella fissazione o nel processamento.

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