Acetyl-Histone H4 (K8) Anticorpo Policlonale Coniglio (P62805) - WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA, ChIP, ChIP-seq

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H4

L'istone H4 è un componente fondamentale del nucleosoma, l'unità ripetitiva fondamentale della cromatina. I nucleosomi avvolgono e compattano il DNA, limitando così l'accessibilità del DNA ai macchinari cellulari che richiedono il DNA come stampo. Attraverso queste interazioni, gli istoni svolgono un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica.

L'accessibilità del DNA è governata da un complesso insieme di modificazioni post-traduzionali (PTM) sugli istoni, collettivamente definite come "codice degli istoni", nonché dal rimodellamento dei nucleosomi. L'istone H4 è ampiamente modificato, in particolare sulla sua coda N-terminale, con marcature che includono acetilazione, metilazione, fosforilazione, citrullinazione e ubiquitinazione.

L'acetilazione della lisina 8 (K8) dell'istone H4—corrispondente alla posizione 9 nella sequenza UniProt (P62805)—è una modificazione ben caratterizzata associata alla cromatina aperta e all'attivazione trascrizionale. Questa modificazione è regolata dinamicamente dalle istone acetiltransferasi (HAT) e dalle deacetilasi (HDAC). Riferimenti correlati: PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:19608861.

L'istone H4 è localizzato principalmente nel nucleo e sui cromosomi. In certi tipi cellulari, come gli spermatidi, si osserva che l'H4 acetilata si concentra nel nucleo durante specifici stadi dello sviluppo.

L'istone H4 è codificato da multiple copie geniche, tra cui HIST1H4A fino a HIST1H4L, HIST2H4A/B e HIST4H4, che producono sequenze proteiche identiche. Questa alta conservazione tra le specie supporta la sua ampia reattività crociata prevista.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per ChIP e ChIP-seq, considerare l'ottimizzazione delle condizioni di cross-linking e di frammentazione della cromatina per preservare la labile modificazione acetilica. L'uso di inibitori delle istone deacetilasi (es. butirrato di sodio, TSA) durante la raccolta delle cellule può potenziare il rilevamento.
• Nel Western blotting (WB), si raccomanda di includere sia il peptide acetil-istone H4 che il peptide non acetilato come controlli di blocco per confermare la specificità dell'anticorpo.
• Poiché l'istone H4 è altamente conservato, ci si aspetta che questo anticorpo cross-reagisca con un'ampia gamma di specie; tuttavia, è consigliabile la validazione nel sistema di campione pertinente.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), i protocolli di fissazione e permeabilizzazione dovrebbero essere valutati attentamente, poiché l'epitopo acetilato può essere sensibile a trattamenti rigidi.
• Quando si utilizza questo anticorpo, la coerenza tra lotti dovrebbe essere monitorata, specialmente negli saggi quantitativi, come è standard per i reagenti policlonali.

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