Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Acetil-Istone H4 (K8ac) - P62805 | Validato in WB, IP, IHC-P, ChIP

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'Istone H4

L'Istone H4 è un componente fondamentale del nucleosoma, che impacchetta il DNA in cromatina e regola l'accesso alle informazioni genetiche. È essenziale per la trascrizione, la riparazione del DNA, la replicazione e la stabilità cromosomica. Le modifiche post-traduzionali (PTM) dinamiche degli istoni, collettivamente chiamate "codice degli istoni", svolgono un ruolo chiave nella regolazione epigenetica.

L'acetilazione dell'istone H4, in particolare sui residui di lisina come K8, è un marcatore ben consolidato associato alla cromatina aperta e alla trascrizione genica attiva. Lo stato di acetilazione è regolato dinamicamente dalle istone acetiltransferasi (HAT) e deacetilasi (HDAC).

A livello subcellulare, l'istone H4 è localizzato principalmente nel nucleo e sui cromosomi. È soggetto a numerosi tipi di PTM tra cui acetilazione, metilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, che ne modulano la funzione.

Riferimenti correlati: PMID:17967882, PMID:19608861

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot (WB), rilevare l'acetil-istone H4 endogeno a circa 11 kDa. Utilizzare istoni estratti con acido o lisati nucleari sonificati. Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo (si suggerisce di iniziare con 0,5-2 µg/mL) e utilizzare controlli di caricamento appropriati (es. istone H4 o H3 totale).
• Per l'Immunoprecipitazione (IP), sono raccomandati metodi di preparazione della cromatina cross-linkata per preservare i marcatori di acetilazione. L'anticorpo può essere adatto per il ChIP nativo; considerare l'uso di PCR quantitativa o sequenziamento per l'analisi.
• Per IHC-P, la recupero dell'antigene con buffer citrato (pH 6.0) può migliorare la colorazione. Includere tessuti di controllo positivo e negativo con livelli di acetilazione noti.
• Per l'ELISA, questo anticorpo può essere utilizzato per saggi di rilevamento basati su peptidi o istoni. Validare la specificità utilizzando un peptide non acetilato.

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