Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Acetil-Istone H4 K91 (P62805) – WB, IF/ICC, ELISA

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H4

L'Istone H4 è uno degli istoni core che formano il nucleosoma, l'unità fondamentale della cromatina. Insieme a H2A, H2B e H3, avvolge il DNA attorno all'ottamero istonico, compattando il genoma e regolando l'accesso per la trascrizione, la replicazione e la riparazione. L'Istone H4 svolge un ruolo centrale nella regolazione dinamica della struttura della cromatina attraverso una vasta gamma di modifiche post-traduzionali (PTM), collettivamente note come "codice istonico". Queste modifiche includono acetilazione, metilazione, fosforilazione, ubiquitinazione e molte altre, che si verificano prevalentemente sulla coda N-terminale ma anche sul dominio globulare.

L'acetilazione di specifici residui di lisina sull'istone H4 è associata all'attivazione trascrizionale e alla struttura aperta della cromatina. La lisina 91 (K91), situata all'interno del dominio globulare di H4, è uno di questi residui che può essere acetilato. È stato dimostrato che l'acetilazione a K91 (corrispondente a K92 nell'isoforma UniProt P62805) regola la dinamica della cromatina e può influenzare i processi di riparazione del DNA. Riferimenti correlati: PMID:19818714

L'elevata natura conservata dell'Istone H4 negli eucarioti garantisce che anticorpi specifici per l'acetilazione come questo anti-acetil-H4-K91 mostrino un'ampia reattività incrociata, rendendoli strumenti preziosi per studi epigenetici in più specie. H4 è localizzato prevalentemente nel nucleo, associato ai cromosomi, ed è presente durante tutto il ciclo cellulare, con modelli di acetilazione specifici che cambiano durante la differenziazione e lo sviluppo. Riferimenti correlati: UniProt P62805

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blot (WB), utilizzare estratti nucleari arricchiti in istoni o istoni estratti con acido per migliorare il rilevamento. Considerare l'inclusione di un controllo negativo come un peptide non acetilato o un trattamento con inibitore della deacetilasi (es. TSA) per confermare la specificità per la forma acetilata K91. Il peso molecolare previsto dell'Istone H4 è di circa 11 kDa, ma la migrazione può variare leggermente a seconda delle PTM.
• Nell'immunofluorescenza / immunocitochimica (IF/ICC), ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione (es. fissazione con PFA al 4% o metanolo, seguita da Triton X-100 allo 0,1%) per preservare l'epitopo. La colorazione con coloranti per il DNA (es. DAPI) può confermare la localizzazione nucleare.
• Per le applicazioni ELISA, utilizzare il peptide sintetico acetilato K91 rispetto al peptide non modificato come antigene di rivestimento per valutare la specificità e il titolo dell'anticorpo. Si prevede che questo anticorpo reagisca in modo incrociato con topo, ratto e altre specie a causa dell'elevata omologia di sequenza dell'Istone H4, ma verificare nel proprio sistema sperimentale.

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