Anticorpo monoclonale di coniglio Acetyl-Histone H4 (Lys5) (P62805) per WB, ChIP, CUT&Tag

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'istone H4

L'istone H4 è un componente centrale del nucleosoma, essenziale per la compattazione del DNA in cromatina e la regolazione della trascrizione, replicazione, riparazione del DNA e stabilità cromosomica. L'accessibilità del DNA è governata da un complesso insieme di modifiche post-traduzionali note come "codice istonico".

L'acetilazione dell'istone H4 alla lisina 5 (K5; corrispondente a Lys-6 in UniProt P62805) è una modifica fondamentale associata a stati di cromatina attiva. Questo segnale è depositato da acetiltransferasi istoniche (HAT) e rimosso da deacetilasi (HDAC), influenzando dinamicamente l'espressione genica. L'H4K5 acetilato è arricchito nelle regioni promotrici di geni attivamente trascritti e contribuisce alla decompattazione della cromatina e all'attivazione trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:19608861

L'istone H4 è codificato da multiple copie geniche (H4C1–H4C16) localizzate in cluster istonici sui cromosomi 1 e 6. La proteina è altamente conservata tra le specie, il che spiega la prevista ampia reattività crociata di questo anticorpo. L'H4 è soggetto a estese modifiche combinatorie; K5 può anche subire altre acilazioni come crotonilazione, butirrilazione e 2-idrossiisobutirrilazione, evidenziando la complessità del codice istonico.

A livello subcellulare, l'istone H4 è principalmente nucleare e si associa ai cromosomi. Durante la spermatogenesi, l'H4 acetilato si localizza nel nucleo negli spermatidi allo stadio 11. Le modifiche della coda N-terminale, inclusa l'acetilazione di K5, svolgono ruoli fondamentali nel rimodellamento della cromatina e nel reclutamento di proteine effettrici. Riferimenti correlati: UniProt P62805

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo monoclonale di coniglio è stato generato contro un peptide sintetico acetilato che abbraccia la lisina 5 dell'istone H4 umano. Si prevede che riconosca specificamente l'H4 acetilato a K5 (Lys-6 in UniProt P62805) e possa avere una reattività crociata minima verso H4 non modificato o altre lisine acetilate.
• Per il Western blot (WB), considerare l'uso di preparazioni proteiche arricchite in istoni o estratte con acido per migliorare il segnale. Il peso molecolare previsto per l'istone H4 è di 11 kDa.
• Nell'immunoprecipitazione (IP) e nelle applicazioni basate sulla cromatina (ChIP, ChIP-seq, CUT&Tag), titolare l'anticorpo e ottimizzare le condizioni di reticolazione/fissazione. L'ampia reattività crociata prevista tra specie (umano, topo, ratto e altre) suggerisce utilità in modelli mammiferi diversi, ma si raccomanda la validazione nel sistema campione specifico.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P) e l'ELISA, assicurarsi di utilizzare controlli appropriati (es. competizione con peptide non acetilato) per confermare la specificità del segnale.

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