Acetyl-HMGB1 (Lys29) Anticorpo Policlonale Coniglio (P09429) per WB, IF/ICC, ELISA

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Proteina B1 del gruppo ad alta mobilità (HMGB1)

• HMGB1 è una proteina cromosomica non istonica altamente abbondante e ubiquitariamente espressa che funge da chaperone del DNA, regolando la trascrizione, la replicazione, la riparazione del DNA e la stabilità del genoma. Agisce anche come pattern molecolare associato al danno (DAMP) extracellulare durante lesioni e infiammazioni. Riferimenti correlati: PMID:33147444, PMID:27362237

• La localizzazione subcellulare di HMGB1 è regolata dinamicamente. In condizioni basali, risiede principalmente nel nucleo, ma trasloca continuamente tra nucleo e citoplasma. A seguito di determinati stimoli o stress, subisce modifiche post-traduzionali, inclusa l'acetilazione di residuii di lisina chiave all'interno dei suoi segnali di localizzazione nucleare (NLS1: aa 28-44, NLS2: aa 179-185), promuovendo il suo accumulo citoplasmatico e la secrezione attiva tramite una via non convenzionale mediata dai lisosomi. Riferimenti correlati: PMID:12231511, PMID:17114460

• L'acetilazione a Lys29 (K29) è una delle diverse modifiche critiche che regolano il traffico di HMGB1. L'iperacetilazione della regione NLS1, inclusa K29, interrompe l'importazione nucleare e facilita la rilocalizzazione di HMGB1 nel citoplasma e il suo successivo rilascio nello spazio extracellulare, dove può esercitare attività simili a citochine. Riferimenti correlati: UniProt P09429

• Nell'ambiente extracellulare, lo stato redox di HMGB1 detta la sua funzione: HMGB1 completamente ridotta agisce come chemochina, HMGB1 disolfuro come citochina e HMGB1 ossidata promuove la tolleranza immunologica. HMGB1 extracellulare si lega a recettori come RAGE, TLR2 e TLR4 per attivare risposte immunitarie innate, rendendola un mediatore critico nella sepsi, nelle malattie autoimmuni e nel cancro. Riferimenti correlati: PMID:23446148, PMID:23519706

• HMGB1 svolge anche ruoli nella patogenesi microbica, facilitando l'ingresso di SARS-CoV-2 e altri virus, e regolando l'autofagia e l'attivazione dell'infammasoma. Riferimenti correlati: PMID:35239449, PMID:22696656

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• A causa della natura reversibile dell'acetilazione, includere inibitori delle deacetilasi (es. tricostatina A, nicotinamide) nei buffer di lisi per preservare HMGB1 acetilata durante la preparazione del campione.
• Per il Western blotting, il peso molecolare atteso di HMGB1 è di circa 25 kDa, ma le modifiche post-traduzionali possono causare lievi spostamenti. Utilizzare cellule in fase logaritmica iniziale o stimolate come controlli positivi.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, il segnale di acetyl-HMGB1-K29 può essere prevalentemente citoplasmatico o extracellulare dopo induzione dell'acetilazione (es. trattamento con LPS) rispetto alla colorazione nucleare nelle cellule a riposo.
• Per le applicazioni ELISA, considerare l'utilizzo di questo anticorpo come reagente di cattura o rilevamento abbinato a un anticorpo pan-HMGB1 per quantificare specificamente HMGB1 acetilata nei fluidi biologici.
• È stata indicata la reattività crociata con HMGB1 di topo e ratto; tuttavia, si consiglia la validazione nel sistema di campione pertinente.

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