Anticorpo policlonale coniglio AFAP1 per WB, IF/ICC, ELISA - Q8N556

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'AFAP1

• AFAP1 (Actin filament-associated protein 1), noto anche come AFAP-110 (proteina associata ai filamenti di actina da 110 kDa), è una proteina impalcatura che collega le vie di trasduzione dei segnali al citoscheletro di actina.
• Può cross-linkare i filamenti di actina in strutture sia reticolari che a fascio, modulando l'integrità dei filamenti di actina e inducendo la formazione di lamellipodi.
• Funge da molecola adattatrice che collega le chinasi SRC e PKC al citoscheletro di actina, potenzialmente regolando la dinamica del citoscheletro.
• Gioca un ruolo nello sviluppo e nella progressione dell'adenocarcinoma prostatico regolando le adesioni cellula-matrice e la migrazione nelle cellule cancerose.
• Si localizza nel citoplasma, specificamente associato ai fibre di stress del citoscheletro.
• L'espressione tissutale varia: bassa nelle linee cellulari epiteliali mammarie normali (MCF-10A) e nelle linee di cancro al seno tumorigeniche (MCF-7, T-47D, ZR-75-1), ma altamente espressa nelle linee di cancro al seno invasive (MDA-MB-231, MDA-MB-435) e sovraespressa nel carcinoma prostatico.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione; la proteina presenta anche regioni a elica alfa e sequenze ripetute.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 461-730, una regione probabilmente coinvolta nel legame con l'actina o nelle interazioni proteiche; considerare questo durante la progettazione di saggi dipendenti dall'epitopo.
• Per il Western blot, i lisati da linee cellulari di cancro invasive (es. MDA-MB-231 per il cancro al seno o cellule di carcinoma prostatico) possono mostrare un segnale AFAP1 più forte a causa della sovraespressione; convalidare nel proprio sistema di campioni specifico.
• Il peso molecolare previsto è di ~81 kDa, ma la migrazione effettiva può variare; utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati.
• È stato riferito che l'anticorpo funziona in WB, IF/ICC ed ELISA; per l'immunofluorescenza, le condizioni di permeabilizzazione e fissazione dovrebbero essere ottimizzate per la visualizzazione del citoscheletro.

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