Anticorpo monoclonale di coniglio anti-14-3-3 sigma per WB, IHC-P, ELISA - P31947

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della 14-3-3 sigma

• La 14-3-3 sigma (conosciuta anche come Stratifin o Epithelial cell marker protein 1) è una proteina adattatrice codificata dal gene SFN, espressa prevalentemente in tessuti ricchi di epitelio squamoso stratificato cheratinizzante.
• Funziona legando motivi fosfoserina/fosfotreonina su un'ampia gamma di partner di segnalazione, generalmente modulandone l'attività, ed è coinvolta in pathway come il ciclo cellulare, l'apoptosi e la segnalazione della crescita (PubMed:15731107, PubMed:22634725, PubMed:28202711). Riferimenti correlati: PMID:15731107, PMID:22634725, PMID:28202711
• Agisce come un inibitore regolato da TP53/p53 della progressione del ciclo cellulare in G2/M, contribuendo al checkpoint del danno al DNA (PubMed:9659898). Riferimenti correlati: PMID:9659898
• La 14-3-3 sigma promuove la ritenzione citosolica della GTPasi GBP1 legandosi alla GBP1 fosforilata, inibendo così la risposta immunitaria innata (PubMed:37797010). Riferimenti correlati: PMID:37797010
• Nelle cellule epiteliali, mantiene l'adesione delle giunzioni cellulari desmosomiche interagendo con PKP3 e sequestrandolo nel citoplasma, facilitando lo scambio alle placche desmosomiche e preservando l'adesione intercellulare (PubMed:24124604, PubMed:29678907). Riferimenti correlati: PMID:24124604, PMID:29678907
• La proteina può regolare l'autoubiquitinazione e la degradazione di MDM2, attivando così p53/TP53 (PubMed:18382127). Riferimenti correlati: PMID:18382127
• La localizzazione subcellulare include il citoplasma, il nucleo e la secrezione, coerente con i suoi molteplici ruoli nella trasduzione del segnale e nella comunicazione intercellulare.
• Le modifiche post-traduzionali chiave includono fosforilazione e coniugazione con ubiquitina, che modulano finemente le sue funzioni e interazioni.
• L'espressione tissutale è largamente limitata agli epiteli squamosi stratificati, rendendola un marcatore utile per studi di differenziazione epiteliale e patologia.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico mappato nella regione N-terminale (amminoacidi 1-100) della 14-3-3 sigma umana. Questa regione può contenere fosfoepitopi critici; assicurarsi che la preparazione del campione preservi gli stati di fosforilazione se rilevanti.
• Per il Western blot (WB), prevedere una banda intorno a 28 kDa (il peso molecolare calcolato è ~27.8 kDa). Validare con appropriati controlli positivi, come lisati da tessuto epiteliale stratificato o linee cellulari (es. HaCaT, A431) dove ci si aspetta espressione endogena.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), considerare metodi di recupero dell'antigene (es. buffer citrato, pH 6.0) e verificare la specificità utilizzando pelle, esofago o altri tessuti di epitelio squamoso come controlli positivi.
• In ELISA, l'immunogeno a base di peptide consente il rivestimento diretto del peptide per configurazioni standard del saggio; titrare la concentrazione dell'anticorpo per ottimizzare il rapporto segnale/rumore.
• È riportata reattività crociata con la 14-3-3 sigma murina; tuttavia, si raccomanda un allineamento delle sequenze tra specie prima di applicare l'anticorpo ad altri organismi modello.

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