Anticorpo policlonale anti-14-3-3 Theta per WB, ELISA - P27348

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della 14-3-3 Theta

• La proteina 14-3-3 theta, denominata anche proteina 14-3-3 delle cellule T, proteina 14-3-3 tau o proteina HS1, è codificata dal gene YWHAQ.
• Funziona come proteina adattatrice in numerose vie di segnalazione, legandosi tipicamente a motivi contenenti fosfoserina o fosfotreonina sulle proteine partner e modulandone così l'attività.
• In particolare, la 14-3-3 theta regola negativamente l'attività chinasica di PDPK1, influenzando le reti di segnalazione a valle.
• La proteina è localizzata principalmente nel citoplasma, coerentemente con il suo ruolo nella trasduzione dei segnali intracellulari.
• L'espressione è abbondante nel cervello, nel cuore e nel pancreas, mentre è più bassa nel rene e nella placenta. È stato inoltre osservato un aumento della sua espressione nel midollo spinale lombare dei pazienti con SLA sporadica, in particolare nei pazienti con prevalente coinvolgimento dei motoneuroni inferiori.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, nitratazione, fosforilazione e coniugazione ubiquitina-simile, oltre alla formazione di legami isopeptidici, che probabilmente regolano le sue interazioni e la sua stabilità.
• È disponibile una struttura tridimensionale, che fornisce informazioni sulla sua scanalatura di legame ai fosfopeptidi e sulla sua architettura dimerica.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno, un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 49–149 della 14-3-3 theta umana, è diretto contro una regione specifica e può essere adatto al rilevamento di epitopi lineari in condizioni denaturanti di Western blot (WB).
• Per l'ELISA, si può considerare l'uso del peptide immunogeno come controllo positivo o antigene di rivestimento per convalidare la specificità del test.
• Poiché è stata segnalata una reattività crociata con topo e ratto, questo anticorpo può essere utilizzato in studi comparativi; confermare la reattività nel tessuto o nella linea cellulare di interesse prima dell'analisi quantitativa.
• Il peso molecolare previsto è di circa 28 kDa; verificare la dimensione della banda utilizzando marcatori di peso molecolare appropriati e considerare che le modifiche post-traduzionali possono causare leggere variazioni.
• Poiché la 14-3-3 theta è citoplasmatica, il frazionamento subcellulare o l'immunoprecipitazione possono arricchire il bersaglio e migliorare la sensibilità di rilevamento in campioni complessi.
• Gli anticorpi policlonali possono mostrare variazioni tra diversi lotti; includere un'ottimizzazione appropriata delle fasi di blocco e lavaggio per ridurre al minimo il legame aspecifico.

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