Anticorpo policlonale anti-A2ML1 da coniglio per WB, ELISA - A8K2U0

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della proteina 1 simile all'alfa-2-macroglobulina

• A2ML1 (Proteina 1 simile all'alfa-2-macroglobulina) è un inibitore di proteasi secretore appartenente alla famiglia dell'alfa-2-macroglobulina. È anche nota come OMS, p170 o CPAMD9.
• Inibisce tutte e quattro le classi di proteinasi tramite un unico meccanismo di intrappolamento. Una regione esca con siti di clivaggio specifici, una volta clivata, induce un cambiamento conformazionale che intrappola la proteasi. L'enzima intrappolato rimane attivo contro i substrati piccoli ma non contro quelli grandi.
• Successivamente al clivaggio, un legame tioestere viene idrolizzato, mediando il legame covalente dell'A2ML1 alla proteasi. Questo meccanismo coinvolge chiavi legami disolfuro e contribuisce alla sua specificità inibitoria.
• A2ML1 mostra attività inibitoria contro chimotripsina, papaina, termolisina e subtilisina A, e in minore misura elastasi, ma non tripsina.
• La proteina potrebbe svolgere un ruolo importante nella desquamazione epidermica inibendo le proteasi extracellulari. È espressa prevalentemente nello strato granulare al bordo apicale dei cheratinociti, con ulteriore espressione nella placenta, nei testicoli e nel timo.
• Codificata dal gene A2ML1 sul cromosoma 12 (locus 12p13.31), la proteina subisce splicing alternativo e viene rilevata come una glicoproteina da 161 kDa.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per l'analisi Western blot, considerare l'uso di SDS-PAGE riducente per rilevare una banda a circa 161 kDa. Validare l'anticorpo nel sistema di lisati cellulari o tissutali pertinente.
• L'immunogeno (amminoacidi 400-500) è probabilmente conservato tra umano e ratto, supportando la reattività crociata riportata. Eseguire l'allineamento delle sequenze per verificare la conservazione dell'epitopo se si utilizza questo anticorpo in altre specie.
• Per le applicazioni ELISA, titolare l'anticorpo per determinare le concentrazioni ottimali di rivestimento e rilevamento contro l'A2ML1 nativa o ricombinante. Includere i controlli appropriati per minimizzare il fondo.
• Data la funzione della proteina nell'inibizione delle proteasi, fare attenzione alle potenziali interazioni con le proteasi endogene nelle preparazioni dei campioni che potrebbero influenzare il rilevamento.

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