Anticorpo monoclonale di coniglio anti-ABCA1 per WB, ELISA - O95477

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di ABCA1

• ABCA1 (membro 1 della sottofamiglia A del trasportatore ATP-binding cassette), noto anche come ABC-1, CERP e proteina regolatrice dell'efflusso del colesterolo, è un membro della superfamiglia dei trasportatori ATP-binding cassette (ABC).
• Funziona come un'ATPasi responsabile del trasporto dei fosfolipidi, trasferendo fosfatidilcolina e fosfatidilserina dal foglietto citoplasmatico a quello extracellulare delle membrane, in associazione all'idrolisi dell'ATP. Questa attività è essenziale per il trasferimento dei fosfolipidi alle apolipoproteine, avviando la formazione delle lipoproteine ad alta densità (HDL) nascenti. Riferimenti correlati: PMID:24097981, PMID:35974019
• ABCA1 media inoltre l'efflusso del colesterolo intracellulare verso le apolipoproteine, un passaggio critico nel trasporto inverso del colesterolo e nella maturazione delle HDL. Riferimenti correlati: PMID:10533863, PMID:14754908, PMID:24097981
• Localizzato principalmente sulla membrana cellulare e negli endosomi, ABCA1 è ampiamente espresso, ma raggiunge i livelli più elevati nei macrofagi, riflettendo il suo ruolo chiave nell'omeostasi del colesterolo dei macrofagi.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione (fosfoproteina) e la palmitoilazione (lipidazione); la proteina contiene inoltre legami disolfuro e siti di glicosilazione, che possono regolarne la stabilità e l'attività.
• Data la sua funzione nel metabolismo lipidico, ABCA1 è implicato nell'aterosclerosi e nelle patologie cardiovascolari correlate; le mutazioni di ABCA1 sono associate alla malattia di Tangier e alla carenza familiare di HDL.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1170-1350 nella regione C-terminale dell'ABCA1 umano. Questa regione è predetta essere intracellulare e gli anticorpi prodotti contro di essa possono rilevare l'ABCA1 a lunghezza intera nei Western blot denaturanti. Si consiglia di validare la specificità in linee cellulari con espressione nota di ABCA1, come macrofagi o epatociti.
• Per il Western blotting, considerare l'elevato peso molecolare previsto di ABCA1 (~254 kDa). Utilizzare gel di poliacrilammide a bassa percentuale (ad esempio, gel al 6%) e tempi di trasferimento prolungati per garantire un trasferimento efficiente delle proteine ad alto peso molecolare. Includere marcatori di peso molecolare appropriati.
• È stato riportato che questo anticorpo presenta reattività crociata con ABCA1 di topo e ratto. Quando viene utilizzato in queste specie, verificare la reattività testando un controllo positivo, come cellule o tessuti derivati da macrofagi noti per esprimere ABCA1.
• Per le applicazioni ELISA, ottimizzare la concentrazione dell'anticorpo come reagente di cattura o di rilevazione. La reattività dell'anticorpo nell'ELISA può consentire la misurazione quantitativa di ABCA1 in campioni biologici; tuttavia, per i formati sandwich potrebbe essere necessario abbinarlo a un anticorpo di rilevazione appropriato.

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