Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-ABCA2 per WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - Q9BZC7

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ABCA2

• ABCA2 (membro 2 della sottocategoria A dei trasportatori leganti ATP), noto anche come trasportatore 2 legante ATP o ABC2, è un membro della superfamiglia dei trasportatori ABC coinvolto nella traslocazione ATP-dipendente di substrati attraverso le membrane.
• Funziona come un probabile trasportatore lipidico che modula il sequestro del colesterolo nell'endosoma tardivo/lisosoma regolando il metabolismo intracellulare degli sfingolipidi, partecipando all'omeostasi del colesterolo. Riferimenti correlati: PMID:15238223, PMID:21810484, PMID:24201375
• ABCA2 può alterare la distribuzione trans-bilayer del ceramide nei doppi strati della membrana intraluminale, favorendone la ritenzione nel foglietto esterno e portando ad un aumento dell'attività dell'acido ceramidasi, che facilita la deacilazione del ceramide in sfingosina e il sequestro lisosomiale del colesterolo libero. Riferimenti correlati: PMID:24201375
• La proteina è coinvolta anche nella regolazione della produzione di amiloide-beta (Aβ), sia modulando il metabolismo degli sfingolipidi per influenzare la trascrizione della proteina precursore dell'amiloide (APP) che attraverso il suo ruolo nell'elaborazione di APP da parte della γ-secretasi. Riferimenti correlati: PMID:22086926, PMID:26510981
• ABCA2 può svolgere un ruolo nella formazione della mielina (per somiglianza).
• A livello subcellulare, ABCA2 si localizza principalmente sulle membrane degli endosomi e dei lisosomi.
• L'analisi dell'espressione tissutale mostra alti livelli nel cervello, nei leucociti del sangue periferico e nell'ovaio, con espressione inferiore nel rene e nel fegato.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione, fosforilazione e metilazione; la proteina presenta due domini leganti ATP e multiple eliche transmembrana, coerenti con la sua funzione di trasportatore.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 140–350) si trova nella regione N-terminale di ABCA2 umano; gli utenti dovrebbero verificare l'identità della sequenza con la specie bersaglio se si prevede una reattività incrociata oltre umano, topo e ratto.
• Per il Western blot, a causa delle grandi dimensioni della proteina (~270 kDa), utilizzare un gel di poliacrilammide ad alta percentuale (es. 6–8%) e tempi di trasferimento prolungati per un blotting efficiente.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica, i protocolli di fissazione e permeabilizzazione dovrebbero essere ottimizzati per rilevare le proteine di membrana endosomiali/lisosomiali; considerare l'uso di permeabilizzazione a base di metanolo o detergente.
• Le prestazioni ELISA possono essere valutate utilizzando frammenti ricombinanti di ABCA2 o lisati cellulari; l'ELISA indiretto può essere adatto per la determinazione del titolo.
• Quando si analizzano tessuti di topo o ratto, confermare la reattività incrociata attraverso l'allineamento della sequenza della regione immunogena e considerare l'uso di controlli positivi appropriati.

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