Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-ABCG2 per WB, ELISA - Q9UNQ0

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ABCG2

• ABCG2, noto anche come proteina della resistenza del cancro al seno (BCRP), è un membro della sottofamiglia G dei trasportatori ATP-binding cassette (ABC). Codifica per un trasportatore dipendente da ATP con ampia specificità per il substrato, che presenta più isoforme generate da splicing alternativo.
• ABCG2 funziona come pompa di efflusso che espelle attivamente un'ampia gamma di xenobiotici, composti fisiologici e tossine alimentari, conferendo quindi resistenza a più farmaci attraverso l'esportazione di agenti chemioterapici come mitoxantrone, methotrexate e antracicline. Riferimenti correlati: PMID:11306452, PMID:12958161, PMID:12477054, PMID:15670731
• Il trasportatore media l'omeostasi delle porfirine esportando protoporfirina IX ed eme, regola la segnalazione della sfingosina-1-fosfato, funge da esportatore di urati e secerne steroidi coniugati solfati e vitamine in molteplici fluidi corporei. Riferimenti correlati: PMID:20705604, PMID:23189181, PMID:20110355, PMID:19506252, PMID:20368174, PMID:22132962, PMID:12682043, PMID:28554189, PMID:30405239, PMID:39337371
• ABCG2 è localizzato prevalentemente sulla membrana cellulare apicale ed è rilevabile anche sulla membrana mitocondriale, in linea con il suo ruolo nell'efflusso cellulare e nel trasporto a livello degli organelli.
• La proteina è altamente espressa nella placenta, mentre si riscontrano livelli più bassi nell'intestino tenue, fegato, colon e cervello, indicando un coinvolgimento nelle funzioni di barriera tissutale e di escrezione. Riferimenti correlati: PMID:9850061, PMID:9861027, PMID:12958161
• Oltre al trasporto di farmaci, ABCG2 può essere coinvolto nell'autorenewal delle cellule staminali e nell'immunità innata, esportando itaconato dai macrofagi infiammatori, limitando la biogenesi dei lisosomi e le risposte antibatteriche.
• Le modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione, fosforilazione e formazione di legami disolfuro, che sono importanti per la stabilità e la funzione della proteina transmembrana.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Il peptide immunogeno (amminoacidi 100–200 di ABCG2 umano) si trova all'interno del dominio intracellulare; pertanto, la permeabilizzazione può essere necessaria per rilevare l'epitopo in campioni fissati.
• Nell'analisi Western blot, ci si aspetta una banda principale vicino a 72 kDa; tuttavia, modificazioni post-traduzionali come la glicosilazione possono causare lievi spostamenti nella migrazione. Per una rilevazione ottimale utilizzare protocolli di estrazione delle proteine di membrana.
• Quando si utilizza l'ELISA, è consigliabile ottimizzare le condizioni di rivestimento, poiché la natura transmembrana multipercorso di ABCG2 può richiedere buffer o detergenti specifici per esporre l'epitopo.
• L'anticorpo è validato per la reattività con l'uomo; per la reattività incrociata con altre specie si raccomanda una verifica sperimentale.
• A causa dell'espressione di ABCG2 nelle cellule tumorali resistenti ai farmaci e in tessuti normali come la placenta, includere controlli positivi e negativi adeguati nei vostri esperimenti.
• Per studi funzionali, combinare questo anticorpo con inibitori come Ko143 per confermare l'attività specifica di ABCG2.

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