Anticorpo monoclonale anti-ABHD5 per WB, ELISA - Q8WTS1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di ABHD5

• ABHD5, ufficialmente denominata 1-acilglicerolo-3-fosfato O-aciltransferasi ABHD5 e nota anche come CGI-58, è una proteina di 39 kDa che si lega alle goccioline lipidiche e appartiene alla superfamiglia delle idrolasi α/β.
• Funziona come aciltransferasi dell'acido lisofosfatidico dipendente dal coenzima A, utilizzando preferenzialmente l'acido 1-oleoil-lisofosfatidico e l'arachidonoil-CoA per produrre acido fosfatidico, un intermedio centrale nella biosintesi dei glicerolipidi. Riferimenti correlati: PMID:18606822
• ABHD5 coattiva la lipasi dei trigliceridi PNPLA2 (ATGL), promuovendo così l'idrolisi dei triacilgliceroli e regolando le dimensioni e la fusione delle goccioline lipidiche. Riferimenti correlati: PMID:16679289
• La proteina è essenziale per la differenziazione dei cheratinociti, collegando il metabolismo lipidico epidermico all'integrità della barriera cutanea. Riferimenti correlati: PMID:18832586
• A livello subcellulare, ABHD5 si distribuisce tra il citosol e la superficie delle goccioline lipidiche, consentendo il contatto diretto con il suo effettore lipasico.
• È ampiamente espressa nei tessuti umani, con livelli proteici elevati soprattutto nel fegato, nel muscolo scheletrico, nel cervello, nella pelle e nei linfociti.
• Le associazioni patologiche e le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e varianti causali nella malattia da accumulo di lipidi neutri con ittiosi (sindrome di Chanarin-Dorfman), nonché difetti neurosensoriali come cataratta e sordità.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, preparare lisati da linee cellulari o tessuti umani o di ratto noti per esprimere ABHD5, come fegato, fibroblasti cutanei o cheratinociti. Dovrebbe essere rilevata una banda specifica a circa 39 kDa. Ottimizzare il blocco e la diluizione dell'anticorpo per ridurre al minimo il fondo.
• Dato l'immunogeno costituito da un peptide sintetico (amminoacidi 100-200), è probabile che l'anticorpo riconosca un epitopo lineare; le condizioni denaturanti e riducenti sono compatibili.
• Per l'ELISA, l'antigene di rivestimento può essere il peptide immunizzante o la proteina ABHD5 ricombinante; convalidare le condizioni del test utilizzando appropriati controlli in bianco e negativi.
• La reattività crociata con il ratto consente studi traslazionali, ma le prestazioni devono essere confermate nella matrice del campione prevista.
• Poiché ABHD5 si distribuisce tra il citosol e le goccioline lipidiche, i protocolli di frazionamento subcellulare possono migliorare il rilevamento in determinati tipi di campione.

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