Anticorpo policlonale coniglio Anti-ACAA1 per WB, ELISA - P09110

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ACAA1

• Codifica per la 3-chetoacil-CoA tiolasi perossisomale (conosciuta anche come beta-chetiolasi), un enzima chiave nella beta-ossidazione degli acidi grassi che catalizza la scissione tiolitica dei 3-chetoacil-CoA a catena lineare (3-ossoacil-CoA). Riferimenti correlati: PMID:11734571 PMID:2882519
• I substrati includono 3-ossoacil-CoA a catena corta, media, lunga e a catena molto lunga, evidenziando il suo ampio spettro di substrati essenziale per il metabolismo energetico. Riferimenti correlati: PMID:11734571 PMID:2882519
• Potrebbe partecipare alla biosintesi degli acidi grassi polinsaturi (PUFA), in particolare nella fase di beta-ossidazione perossisomale che converte l'acido tetracaosaenoico (THA) in acido docosaesaenoico (DHA), un acido grasso omega-3 fondamentale. Riferimenti correlati: PMID:11734571 PMID:2882519
• Si localizza esclusivamente nel perossisoma, dove svolge la sua funzione catalitica; la regione N-terminale contiene un segnale di indirizzamento perossisomale (peptide di transito) che guida l'importazione nell'organello.
• È soggetto a splicing alternativo e fosforilazione, come indicato dalle parole chiave di UniProt; queste modifiche post-traduzionali possono regolare l'attività enzimatica, la localizzazione o la stabilità.
• È classificato come aciltransferasi e transferasi, in base al suo meccanismo di trasferimento di un gruppo acile durante la reazione di tiolisi.
• Dal punto di vista strutturale, la proteina full-length ha un peso molecolare di circa 44 kDa (valore calcolato 44.292 Da), coerente con la banda di 44 kDa osservata nel Western blotting.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato copre gli amminoacidi 27–300, che includono il nucleo catalitico e i domini di legame al substrato; considerare la disponibilità dell'epitopo nelle diverse preparazioni di campione.
• Per il Western blotting, ci si aspetta una banda specifica vicino a 44 kDa; eseguire la validazione nel sistema di campione appropriato (ad esempio frazioni arricchite di perossisomi di uomo o ratto).
• La reattività incrociata con il ratto suggerisce epitopi conservati; in ogni caso verificare sempre la rilevazione specie-specifica nelle condizioni del proprio test.
• Questo anticorpo policlonale può riconoscere più isoforme a causa dello splicing alternativo; se necessario, confermare la specificità per l'isoforma utilizzando controlli ricombinanti.
• Nelle applicazioni ELISA, rivestire la piastra con proteina ACAA1 ricombinante e seguire i protocolli standard di rilevazione indiretta; ottimizzare empiricamente la diluizione dell'anticorpo.

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