Anticorpo policlonale anti-ACAD8 per WB, ELISA - Q9Z0M6

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di ACAD8

• Il recettore E5 accoppiato alle proteine G coinvolto nell'adesione (CD97) funziona come un recettore implicato sia nei processi di adesione sia nella segnalazione nelle fasi iniziali successive all'attivazione dei leucociti.
• Svolge un ruolo essenziale nella migrazione dei leucociti, mediando le interazioni cellula-cellula e il traffico delle cellule immunitarie.
• Appartenente alla famiglia dei GPCR di adesione, presenta un lungo dominio extracellulare con molteplici ripetizioni simili all'EGF che facilitano l'adesione cellulare.
• Lo splicing alternativo genera diverse isoforme con variazioni nel numero di domini simili all'EGF e nella composizione delle subunità, modulando potenzialmente il legame del ligando e la segnalazione a valle.
• La proteina è localizzata principalmente nella membrana cellulare come proteina di membrana multipasso; tuttavia, una forma secreta può essere rilasciata nello spazio extracellulare mediante scissione proteolitica.
• L'espressione è prevalente nelle cellule immunitarie, con livelli elevati rilevati nei polmoni, nella ghiandola timica, nella milza e nel midollo osseo, in particolare sulle cellule mieloidi e su sottopopolazioni di cellule T, B e NK.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione, fosforilazione e formazione di ponti disolfuro, fondamentali per la stabilità strutturale e la funzione del recettore.
• Parole chiave associate: Splicing alternativo, Calcio, Adesione cellulare, Membrana cellulare, Ponte disolfuro, Dominio simile all'EGF, Recettore accoppiato alle proteine G, Glicoproteina, Membrana, Fosfoproteina, Recettore, Ripetizione, Secreto, Segnale, Trasduttore, Elica transmembrana.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è stato progettato contro gli amminoacidi 24-415 di ACAD8 umano; si consiglia di considerare l'allineamento dell'omologia di sequenza tra uomo, topo e ratto per prevedere la reattività crociata.
• Per il Western blotting, preparare lisati cellulari totali da tessuti ricchi di leucociti (ad es. milza, timo) o da cellule immunitarie coltivate e utilizzare un agente riducente adeguato per tenere conto dei ponti disolfuro presenti nel dominio extracellulare.
• Nell'ELISA, utilizzare l'immunogeno ricombinante come controllo positivo e ottimizzare le condizioni di rivestimento per garantire una corretta presentazione dell'antigene; eseguire test di reattività crociata con proteine di topo e ratto per convalidare il rilevamento.
• Dato il peso molecolare previsto del target di 45 kDa (isoforma ACAD8 a lunghezza intera), monitorare la possibile presenza di prodotti di scissione o isoforme, soprattutto nelle frazioni secrete.
• Convalidare l'anticorpo nel contesto biologico pertinente, ad esempio in saggi di adesione o studi di migrazione dei leucociti, per confermare l'affidabilità dell'applicazione funzionale.

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