Anticorpo policlonale Anti-ACC1 per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q13085

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'ACC1

• Codificata dal gene ACACA, l'acetil-CoA carbossilasi 1 (ACC1) è un enzima multifunzionale di 266 kDa che appartiene alla famiglia delle carbossilasi dipendenti dalla biotina e contiene domini carbossilasi della biotina, trasportatore della carbossilasi della biotina e carbossiltransferasi.
• L'ACC1 catalizza la carbossilazione dipendente da ATP dell'acetil-CoA a malonil-CoA, il primo passo e limitante la velocità nella biosintesi de novo degli acidi grassi, procedendo attraverso un meccanismo mediato dalla biotina in due fasi (PubMed:20457939, PubMed:20952656, PubMed:29899443). Riferimenti correlati: PMID:20457939 PMID:20952656 PMID:29899443
• L'enzima funziona come un omodimero e la sua attività è regolata allostericamente da citrato e palmitoil-CoA, svolgendo un ruolo centrale nel metabolismo dei lipidi.
• A livello subcellulare, l'ACC1 è localizzata nel citoplasma e nel citosol, dove fornisce malonil-CoA per la sintesi degli acidi grassi e l'allungamento della catena.
• L'ACC1 è ampiamente espressa, in particolare nel cervello, placenta, muscolo scheletrico, reni, pancreas e tessuto adiposo, ma è assente dal fegato in condizioni normali.
• Le modifiche post-traduzionali, inclusa la fosforilazione e l'acetilazione, modulano l'attività enzimatica dell'ACC1 in risposta ai segnali ormonali e nutrizionali.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 2266–2346 vicino al terminale C dell'ACC1 umano; gli anticorpi mirati a questa regione possono riconoscere la proteina a lunghezza intera e potenzialmente alcune isoforme.
• Per il Western blot, a causa dell'elevato peso molecolare dell'ACC1 (~266 kDa), considerare l'uso di un gel di poliacrilamide a bassa percentuale (es. gel 6%) e l'estensione del tempo di trasferimento con metanolo ridotto per garantire un efficiente trasferimento sulla membrana.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), testare le condizioni di recupero dell'antigene (es. tampone citrato pH 6.0 o EDTA pH 8.0) poiché la fissazione può mascherare gli epitopi di grandi proteine; includere tessuti di controllo positivo come placenta o muscolo scheletrico.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare la fissazione (es. PFA 4%) e la permeabilizzazione (es. Triton X-100) per bilanciare l'accessibilità dell'antigene e la morfologia.
• Come anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti deve essere verificata nel sistema di saggio previsto; considerare l'uso di un lisato di controllo positivo convalidato (es. da cellule HEK-293T o HuH-7) per confermare la reattività.

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