Anticorpo monoclonale anti-Acetil-CoA Carbossilasi per WB, IP, ELISA - Q13085 / O00763

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione dell'Acetil-CoA Carbossilasi 1

• L'acetil-CoA carbossilasi 1 (ACC1) è un enzima citosolico biotina-dipendente che catalizza la carbossilazione ATP-dipendente dell'acetil-CoA a malonil-CoA, il primo passaggio limitante della biosintesi de novo degli acidi grassi. Riferimenti correlati: PMID:20457939, PMID:20952656, PMID:29899443
• La reazione procede in due fasi: carbossilazione ATP-dipendente del gruppo prostetico biotina sul dominio biotin-carbossil carrier (BCC), seguita dal trasferimento del gruppo carbossilico all'acetil-CoA.
• L'ACC1 è un enzima multifunzionale con domini biotina carbossilasi (BC), proteina carrier della biotina carbossilasi (BCCP) e carbossiltransferasi (CT), che ne consentono la complessa attività catalitica.
• La localizzazione subcellulare è principalmente citoplasmatica e citosolica, coerentemente con il suo ruolo nella sintesi citosolica degli acidi grassi.
• Espressione tissutale: L'ACC1 è espressa nel cervello, nella placenta, nel muscolo scheletrico, nei tessuti renali, pancreatici e adiposi; l'espressione è bassa nel tessuto polmonare e non rilevata nel fegato.
• L'enzima è strettamente regolato dalla fosforilazione (es. da AMPK), da effettori allosterici (attivazione da citrato, inibizione da palmitoil-CoA) e dall'uso di promotori alternativi, sottolineando il suo ruolo centrale nel controllo metabolico.
• L'ACC2 (codificato da ACACB) è un'isoforma mitocondriale che genera malonil-CoA per inibire la carnitina palmitoiltransferasi I, regolando l'ossidazione degli acidi grassi; l'anticorpo potrebbe riconoscere sia ACC1 che ACC2 a causa dell'omologia di sequenza.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 500–600 dell'ACC1 umana (NP_942133.1), una regione probabilmente condivisa con l'ACC2; considerare la validazione della specificità dell'isoforma nel sistema di campioni pertinente.
• Per il WB, a causa dell'elevato peso molecolare di ACC1 (265 kDa) e ACC2 (276 kDa), utilizzare gel SDS-PAGE a bassa percentuale (es. 6–8%) e tempi di trasferimento prolungati; includere marker ad alto peso molecolare pre-colorati.
• Verificare le prestazioni dell'anticorpo nella propria specie e applicazione; sebbene validato in umano, topo e ratto, la reattività crociata in altre specie o formati di saggio dovrebbe essere confermata empiricamente.
• Per l'IP, ottimizzare la concentrazione dell'anticorpo e utilizzare sistemi di biglie appropriati (es. proteina A/G); considerare l'impatto della biotinilazione o della biotina endogena sulla rilevazione.
• Nell'ELISA, abbinare questo anticorpo a un reagente di rilevazione ACC adatto; testare la specificità con controlli proteici ricombinanti ACC1 o ACC2.

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