Anticorpo Policlonale Anti-ACLY per WB, IHC-P, IF, ELISA - P53396

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ACLY

• ACLY codifica per l'ATP-citrato sintasi, nota anche come ATP-citrato (pro-S-)-liasi (ACL) o enzima di scissione del citrato. È un enzima lipogenico chiave che catalizza la scissione del citrato in ossalacetato e acetil-CoA, fornendo un substrato critico per la biosintesi de novo dei lipidi.
• L'enzima funge da ponte tra il metabolismo dei carboidrati e la sintesi degli acidi grassi, generando acetil-CoA citosolico, essenziale per la produzione di colesterolo e acidi grassi.
• ACLY è localizzata prevalentemente nel citoplasma e nel citosol, dove accede al citrato esportato dai mitocondri.
• Modificazioni post-traduzionali, inclusa acetilazione e fosforilazione, regolano l'attività di ACLY in risposta a segnali nutrizionali e ormonali.
• Lo splicing alternativo produce varianti trascrizionali multiple, potenzialmente in grado di modulare finemente la funzione enzimatica in tessuti diversi.
• ACLY appartiene alla famiglia delle acil-CoA sintetasi (formanti AMP)/AMP-acido ligasi e richiede ATP e magnesio come cofattori per la sua attività transferasica.
• A causa del suo ruolo centrale nella biosintesi lipidica, ACLY è un bersaglio di interesse nei disturbi metabolici, nella ricerca cardiovascolare e negli studi sul metabolismo tumorale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre la regione C-terminale (amminoacidi 752–1101) di ACLY umana, il che può aumentare la specificità per la proteina target.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di ~121 kDa; si consiglia di utilizzare un gel SDS-PAGE al 6–8% e condizioni di trasferimento appropriate (ad es., trasferimento umido a 100V per 60–90 minuti) per risolvere questa proteina ad alto peso molecolare.
• Nell'IHC-P, i metodi standard di recupero dell'antigene (ad es., tampone citrato pH 6.0) possono essere utili; si raccomandano esperimenti pilota per ottimizzare il rapporto segnale/rumore.
• Per IF/ICC, le condizioni di fissazione e permeabilizzazione dovrebbero essere determinate empiricamente; la fissazione con metanolo o il trattamento con Triton X-100 0.1% sono punti di partenza comuni per target citosolici.
• Per verificare la specificità dell'anticorpo, considerare l'uso di modelli cellulari con knockdown o knockout di ACLY, o confrontare con controlli tissutali positivi/negativi noti.

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