Anticorpo Policlonale Anti-ACP5 per WB, IF, IHC, ELISA - P13686

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Background Biologico: Funzione e Localizzazione di ACP5

• ACP5 codifica per la fosfatasi acida tartrato-resistente di tipo 5 (TRAP, anche nota come TrATPase), un membro della famiglia delle fosfatasi acide responsabile delle reazioni di defosforilazione.
• L'enzima svolge un ruolo chiave nel metabolismo osseo defosforilando l'osteopontina e la sialoproteina ossea, cruciali per la funzione degli osteoclasti e il riassorbimento osseo.
• ACP5 è un enzima lisosomiale; viene sintetizzato con un peptide segnale che lo indirizza al lisosoma, dove esercita la sua attività catalitica.
• Richiede ferro come cofattore, rendendolo una metalloenzima, e contiene ponti disolfuro e siti di glicosilazione importanti per la sua struttura e stabilità.
• Un'espressione elevata di ACP5 è osservata in condizioni patologiche tra cui la malattia di Gaucher, la malattia di Hodgkin e varie leucemie (a cellule capellute, a cellule B e a cellule T), suggerendo il suo potenziale come biomarcatore.
• La proteina è stata caratterizzata mediante sequenziamento proteico diretto e determinazione della struttura 3D, confermandone l'identità e fornendo informazioni sulla sua funzione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 76-325 di ACP5 umano, che include il dominio catalitico; pertanto, l'anticorpo probabilmente rileva la forma matura dell'enzima. Si consiglia di validare in campioni che esprimono osteoclasti attivi o linee cellulari leucemiche.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è 37 kDa; tuttavia, la glicosilazione può causare uno spostamento. Ottimizzare la preparazione del campione e utilizzare controlli appropriati.
• Per l'immunoistochimica (incluso in paraffina, IHC-P), potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene; testare sia con metodi enzimatici che con metodi indotti dal calore.
• Nell'immunofluorescenza, è necessaria la permeabilizzazione per rilevare la localizzazione lisosomiale; la co-colorazione con marcatori lisosomiali può confermare la specificità.
• La reattività crociata con topo e ratto consente studi traslazionali; validare nel vostro specifico sistema modello.
• Le prestazioni dell'ELISA dovrebbero essere verificate con proteina ricombinante o campioni biologici; considerare l'accoppiamento con un anticorpo di rilevazione se si sviluppa un saggio sandwich.

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