Anticorpo Policlonale Anti-ADAM10 per WB, IF/ICC, FC, ELISA - O14672

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ADAM10

• ADAM10, anche noto come Kuzbanian o CDw156, è un membro della famiglia ADAM (a disintegrin and metalloprotease) e funziona come una metalloproteasi transmembrana coinvolta nel distacco dell'ectodominio di vari substrati.
• Scinde il precursore del fattore di necrosi tumorale alfa (TNF-alfa) legato alla membrana per rilasciare TNF solubile, un passaggio critico nella segnalazione infiammatoria. Riferimenti correlati: PMID:20592283
• ADAM10 funge da alfa-secretasi per la proteina precursore dell'amiloide (APP), riducendo la produzione di amiloide-beta e collegandola alla patologia del morbo di Alzheimer. Riferimenti correlati: PMID:11786905, PMID:26686862, PMID:29224781
• Distacca anche altre molecole di adesione e recettori come CD44, caderine, ephrine e ligandi di Notch, regolando così l'adesione cellulare, la migrazione e le vie di segnalazione dello sviluppo.
• A livello subcellulare, ADAM10 si localizza sulla membrana plasmatica, nell'apparato di Golgi, nelle vescicole rivestite da clatrina e nelle giunzioni cellulari (giunzioni aderenti), così come nelle proiezioni neuronali come assoni e dendriti.
• La proteina subisce un complesso processamento post-traduzionale, inclusa glicosilazione, formazione di ponti disolfuro e scissione del suo pro-dominio per generare la proteasi attiva.
• ADAM10 è ampiamente espresso, con alti livelli nel cervello, nei tessuti linfoidi (milza, linfonodo, timo), nel midollo osseo e nella cartilagine, in linea con i suoi ruoli nella neurogenesi e nella funzione immunitaria. Riferimenti correlati: PMID:23676497, PMID:11511685, PMID:9016778

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è una proteina ricombinante che copre gli amminoacidi 214–672 di ADAM10 umano, comprendendo domini extracellulari chiave; l'anticorpo può riconoscere sia le forme a lunghezza intera che quelle scisse.
• Nel Western blot, attendersi una banda principale vicino a 84 kDa per la proteina a lunghezza intera; possono apparire bande aggiuntive a causa del distacco o dell'attivazione. Ottimizzare i controlli di caricamento e validare con i tuoi lisati campione specifici.
• Per l'immunofluorescenza/ICC, testare sia condizioni permeabilizzate che non permeabilizzate per confrontare i pattern di colorazione superficiale e intracellulare.
• Nella citometria a flusso, titolare accuratamente l'anticorpo e utilizzare controlli isotipo per tenere conto del fondo, specialmente quando si analizzano cellule con espressione variabile di ADAM10.
• Quando si esegue l'ELISA, considerare l'abbinamento con un anticorpo di cattura specifico per un epitopo diverso o l'uso di ADAM10 ricombinante come standard per garantire la quantificazione.
• Poiché questo anticorpo è riportato reagire in modo incrociato con ADAM10 di ratto, verificare la reattività nei tuoi campioni derivati da ratto; per altre specie, consultare l'omologia di sequenza e condurre test pilota.

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