Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-ADAM15 per WB, IF/ICC, ELISA - Q13444

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ADAM15

• ADAM15 (proteina 15 contenente dominio disintegrina e metalloproteinasi) è una metalloproteasi ancorata alla membrana appartenente alla famiglia ADAM, anche indicata come MDC-15 o metargidina.
• Presenta attività gelatinolitica e collagenolitica, contribuendo al rimodellamento della matrice extracellulare e alla guarigione delle ferite.
• ADAM15 regola l'adesione cellulare attraverso molteplici meccanismi: media le interazioni delle cellule T, inibisce l'adesione e la migrazione mediata dalla beta-1 integrina nel muscolo liscio delle vie aeree e sopprime la motilità cellulare sulla fibronectina modulando l'espressione dell'integrina alfa-v/beta-1 tramite inattivazione di ERK1/2.
• La proteasi scinde molecole di adesione cellulare come l'E-caderina in risposta alla privazione di fattori di crescita, influenzando l'integrità epiteliale.
• A livello subcellulare, ADAM15 si localizza nel sistema endomembranale, nelle giunzioni aderenti, nelle proiezioni cellulari (ciglia, flagelli) e nelle vescicole secretorie (acrosoma), in linea con ruoli nell'adesione, migrazione e fecondazione.
• La proteina è espressa ubiquitariamente, con rilevamento prominente nel colon, nell'intestino tenue, nel muscolo liscio, nelle cellule mesangiali glomerulari e nell'endotelio vascolare; la sovraespressione nelle lesioni aterosclerotiche evidenzia un ruolo patologico nelle malattie vascolari.
• Le modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione, fosforilazione e formazione di legami disolfuro; è sintetizzata come zimogeno che richiede attivazione proteolitica e contiene domini simili a EGF e di legame SH3.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 540-700 di ADAM15 umano) comprende i domini disintegrina e ricco di cisteine, che sono altamente conservati tra uomo, topo e ratto, supportando la reattività crociata osservata.
• Per il Western blot, aspettarsi una banda intorno a 93 kDa; ottimizzare empiricamente la diluizione dell'anticorpo e i parametri di incubazione per i vostri campioni specifici.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica, l'anticorpo può marcare giunzioni cellulari, proiezioni di superficie o vescicole intracellulari; è opportuno validare protocolli appropriati di fissazione e permeabilizzazione.
• Per l'ELISA, l'utilizzo dell'immunogeno ricombinante come controllo positivo può aiutare nello sviluppo del saggio.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza da lotto a lotto dovrebbe essere verificata per ogni nuovo lotto per garantire prestazioni riproducibili.

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