Anticorpo policlonale di coniglio anti-ADAM8 per WB ed ELISA - P78325

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di ADAM8

• ADAM8 (proteina 8 contenente il dominio della disintegrina e della metalloproteasi), denominata anche CD156a o MS2, è una glicoproteina transmembrana appartenente alla famiglia di metalloproteasi ADAM.
• La proteina è soggetta a splicing alternativo, generando molteplici isoforme con proprietà funzionali potenzialmente distinte.
• ADAM8 è caratterizzata da un'architettura di domini che comprende un pro-dominio, un dominio metalloproteasico, un dominio della disintegrina e una ripetizione simile all'EGF, con un sito catalitico di legame dello zinco essenziale per la sua attività idrolasica.
• Dal punto di vista funzionale, ADAM8 può partecipare al distacco di molecole dalla superficie cellulare ed è coinvolta nell'estravasazione leucocitaria durante le risposte infiammatorie.
• L'analisi della localizzazione subcellulare colloca ADAM8 nella membrana plasmatica come proteina transmembrana di tipo I a singolo passaggio, con il dominio proteasico esposto extracellularmente.
• L'espressione di ADAM8 è osservata prevalentemente sulle cellule immunitarie, in particolare neutrofili e monociti, in accordo con il suo ruolo nell'infiammazione.
• La proteina è soggetta a modifiche post-traduzionali, tra cui glicosilazione e formazione di ponti disolfuro, che possono influenzarne la stabilità e la funzione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per generare questo anticorpo policlonale di coniglio comprende gli amminoacidi 17–300 di ADAM8 umano, coprendo il pro-dominio e il dominio metalloproteasico; questa regione può contribuire a indirizzare epitopi funzionalmente rilevanti.
• Per l'analisi Western blot, si prevede una banda intorno a 89 kDa in base al peso della proteina; convalidare la banda rilevata utilizzando controlli positivi e negativi appropriati o, se necessario, mediante knockdown con siRNA.
• Quando si esegue un ELISA, considerare l'ottimizzazione della concentrazione di rivestimento dell'anticorpo e l'abbinamento con un anticorpo di rilevazione idoneo; la reattività crociata con ADAM8 di topo e ratto consente studi su più specie.
• Si prevede che questo anticorpo riconosca le forme native e denaturate di ADAM8, ma si raccomanda di effettuare test empirici in condizioni riducenti e non riducenti in base alla propria configurazione sperimentale.
• Considerata la natura metalloproteasica di ADAM8, assicurarsi che i tamponi di preparazione dei campioni siano compatibili con la conservazione dell'attività dipendente dallo zinco qualora siano previsti saggi funzionali a valle.

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