Anticorpo policlonale anti-ADAMTS13 per WB, IF/ICC, ELISA - Q76LX8

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ADAMTS13

• ADAMTS13 (Una disintegrina e metalloproteasi con motivi thrombospondina 13), nota anche come proteasi che taglia il fattore von Willebrand (vWF-CP), appartiene alla famiglia delle metalloproteasi ADAMTS.
• Cleava specificamente i grandi multimeri del fattore von Willebrand (vWF) nel plasma in forme più piccole e meno trombogeniche, regolando così la formazione del trombo piastrinico mediata dal vWF.
• Questa attività proteolitica è essenziale per mantenere l'equilibrio emostatico normale e prevenire la trombosi microvascolare eccessiva.
• ADAMTS13 è sintetizzata principalmente nel fegato e secreta nel sangue, dove circola nel plasma.
• La proteina è una metalloproteasi a multidomini che contiene un peptide segnale, un propeptide, un dominio metalloproteasico, un dominio simile alla disintegrina, ripetizioni di thrombospondina di tipo 1 e domini CUB; richiede zinco e calcio per l'attività.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione e formazione di legami disolfuro, ed è noto che esistono isoforme ottenute da splicing alternativo.
• Le parole chiave associate a ADAMTS13 includono coagulazione del sangue, emostasi, idrolasi, metalloproteasi, secreta e variante patologica, che evidenziano il suo ruolo nelle malattie trombotiche.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 50–300 dell'ADAMTS13 umana, una regione nella parte N-terminale della proteina; considerare che la natura policlonale può portare al riconoscimento di più epitopi, incluse potenziali isoforme o prodotti di degradazione.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è 154 kDa, ma a causa della glicosilazione e di altre modifiche, la banda osservata può migrare in una posizione più alta o leggermente diversa; convalidare nel sistema di campioni appropriato (ad esempio, lisato di fegato umano o proteina ricombinante).
• Nell'immunofluorescenza/ICC, è prevista l'espressione endogena nelle cellule epatiche; utilizzare metodi appropriati di fissazione/permeabilizzazione e confermare la specificità del segnale con controlli.
• Per ELISA, questo anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento, ma le condizioni ottimali di diluizione e buffer devono essere determinate sperimentalmente utilizzando antigene purificato o campioni positivi noti.
• Grazie alla reattività crociata dell'anticorpo con topo e ratto, può essere adatto per modelli preclinici, ma verificare sempre la reattività specie-specifica ed eseguire i passaggi di bloccaggio appropriati.

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