Anticorpo Policlonale Anti-ADAMTS5 per WB, ELISA - Q9UNA0

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ADAMTS5

• ADAMTS5, noto anche come aggrecanasi-2, ADAM-TS 11 o ADMP-2, è una metalloproteinasi secreta appartenente alla famiglia delle proteasi extracellulari ADAMTS.
• ADAMTS5 funziona come un enzima degradante la matrice extracellulare (ECM) che mostra attività proteolitica verso i proteoglicani solfato di condroitina ialectani (CSPG) come ACAN, VCAN, BCAN e NCAN, svolgendo un ruolo chiave nel turnover della cartilagine e nel rimodellamento del tessuto connettivo. Riferimenti correlati: PMID:16133547 PMID:18992360
• La proteina si localizza nello spazio extracellulare e nella matrice extracellulare, dove rimodella gli ambienti pericellulari durante lo sviluppo e il mantenimento tissutale.
• ADAMTS5 contiene domini metalloproteasici, disintegrina e ripetizioni trombospondina di tipo 1; l'attività catalitica richiede il legame dello zinco e l'enzima è inizialmente prodotto come zimogeno.
• L'espressione tissutale è rilevata a bassi livelli in placenta, cuore, cervello, cervice, utero, vescica, esofago e cartilagine, con un'abbondanza aumentata nelle capsule articolari artritiche.
• Attraverso il clivaggio della versicana, ADAMTS5 contribuisce alla morfogenesi degli arti e cardiaca embrionale e facilita la fusione dei mioblasti durante lo sviluppo e la rigenerazione del muscolo scheletrico.
• ADAMTS5 partecipa anche alla migrazione dei linfociti T dai linfonodi drenanti in seguito a infezione virale.
• La proteina è soggetta a clivaggio su coppie di residui basici e contiene numerosi ponti disolfuro e siti di glicosilazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide sintetico all'interno degli amminoacidi 601–700 di ADAMTS5 umano (NP_008969.2). Quando si progettano strategie di rilevamento, verificare che la sequenza target sia conservata nella specie di interesse, poiché è stata riportata reattività crociata per umano, topo e ratto.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 101 kDa. Ottimizzare la percentuale di gel (es. poliacrilamide 8–10%) e le condizioni di trasferimento per garantire un blotting efficiente di questa proteina relativamente grande. Includere un lisato di controllo positivo da tessuto placentare o cartilagineo.
• Poiché si tratta di un anticorpo policlonale, potrebbe riconoscere più epitopi; confermare la specificità mediante rilevamento parallelo con un metodo indipendente (es. knockdown con siRNA o competizione con antigene) se necessario.
• Per l'ELISA, associare a un anticorpo di rilevamento adeguato e considerare l'uso di ADAMTS5 ricombinante o estratti tissutali come antigene di cattura. Titolare l'anticorpo per determinare una concentrazione di lavoro ottimale.
• Sebbene l'anticorpo sia validato per WB ed ELISA dal produttore, le prestazioni in altre applicazioni (es. IHC, IF) dovrebbero essere testate empiricamente nelle condizioni di campione e tampone rilevanti.

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