Anticorpo policlonale di coniglio anti-ADAR1 per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P55265

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ADAR1

• ADAR1 (adenosina deaminasi specifica per RNA a doppio filamento) catalizza la deaminazione idrolitica dell'adenosina in inosina nell'RNA a doppio filamento (editing A-a-I), influenzando la traduzione dell'mRNA, lo splicing, la stabilità e la funzione dei microRNA. Riferimenti correlati: PMID:12618436, PMID:7565688, PMID:7972084
• Modifica sia gli RNA virali che quelli cellulari, inclusi i recettori neurotrasmettitoriali (GRIA2, HTR2C, GABRA3) e i genomi virali (HCV, HDV, HIV-1), mostrando effetti sia provirali che antivirali a seconda del contesto.
• ADAR1 è espresso in più isoforme; l'isoforma 1 è indotta dall'interferone e contiene due domini di legame per il DNA-Z, mentre l'isoforma 5 è espressa costitutivamente e manca dei domini N-terminali di legame per il DNA-Z.
• La localizzazione subcellulare include citoplasma, nucleo e nucleolo, che riflette i suoi diversi ruoli nella lavorazione dell'RNA e nell'immunità innata antivirale.
• Le modifiche post-traduzionali chiave includono fosforilazione, metilazione e sumoilazione (come indicato dalle parole chiave), che regolano la sua attività e le sue interazioni.
• Specificità tissutale: espressa ubiquitariamente con i livelli più alti nel cervello e nel polmone; l'isoforma 5 è sovraregolata negli astrocitomi e la sua espressione aumenta con la gravità del tumore. Riferimenti correlati: PMID:7972084
• Svolge la sua funzione nell'immunità innata sopprimendo l'attivazione di PKR e attraverso meccanismi dipendenti dall'editing, evidenziando il suo ruolo nella difesa antivirale e nelle malattie autoimmuni (sindrome di Aicardi-Goutières).

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione interna (aa 200-299) dell'isoforma 1 di ADAR1 umana (NP_001102.2). Verificare l'omologia di sequenza con ADAR1 di topo e ratto per confermare la reattività crociata prevista.
• Per il Western blot, ADAR1 ha un peso molecolare previsto di ~136 kDa; assicurarsi di utilizzare una percentuale di gel e condizioni di trasferimento appropriate per proteine ad alto peso molecolare.
• Per l'immunofluorescenza e l'immunoistochimica, considerare che ADAR1 si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo; convalidare i modelli di colorazione subcellulare nelle linee cellulari o nei tessuti rilevanti.
• L'ELISA può essere utilizzata per la quantificazione, ma le condizioni ottimali di coating dell'antigene e di rivelazione devono essere determinate empiricamente.
• Poiché ADAR1 è indotta dall'interferone, la stimolazione con interferone può aumentare i livelli di espressione in alcuni tipi cellulari.

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