Anticorpo monoclonale anti-Adenilato Kinasi 4 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P27144

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'adenilato chinasi 4

• L'adenilato chinasi 4 (AK4) è una nucleoside fosfato chinasi mitocondriale a ampia specificità che mantiene l'omeostasi nucleotidica cellulare catalizzando le interconversioni dei nucleosidi-fosfato. Riferimenti correlati: PMID:19073142 PMID:19766732 PMID:23416111
• AK4 fosforila preferenzialmente l'AMP in ADP utilizzando l'ATP come donatore di fosfato; quando utilizza il GTP, fosforila esclusivamente l'AMP. Riferimenti correlati: PMID:19766732
• In vitro, AK4 può anche fosforilare CMP, dAMP e dCMP e utilizzare il GTP come donatore di fosfato alternativo. Riferimenti correlati: PMID:19766732 PMID:23416111
• AK4 mostra attività difosfato chinasi, generando vari nucleosidi trifosfati (ATP, CTP, GTP, UTP, TTP, dATP, dCTP, dGTP) dai loro substrati difosfato. Riferimenti correlati: PMID:23416111
• AK4 è localizzata nella matrice mitocondriale.
• AK4 mostra un'espressione elevata nel rene, moderata nel cuore e nel fegato, e bassa nel cervello.
• AK4 protegge le cellule dallo stress ossidativo e modula la rilevazione dell'energia cellulare controllando la fosforilazione di AMPK. Riferimenti correlati: PMID:19130895 PMID:23474458 PMID:24767988 PMID:26980435

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 1–100 dell'AK4 umana, una regione N-terminale probabilmente esposta nella proteina nativa; questo progetto supporta applicazioni come IF/ICC dove la conformazione nativa può essere critica.
• Per il western blot (WB), utilizzare condizioni riducenti per separare la proteina a ~25 kDa. Si consiglia di convalidare la specificità sia in lisati umani che di ratto, poiché è riportata una reattività crociata con il ratto.
• Per IHC-P e IF/ICC è raccomandata l'ottimizzazione della diluizione dell'anticorpo, del recupero dell'antigene e delle condizioni di blocco, poiché le prestazioni possono variare in base al tipo di campione e alla fissazione.
• Nell'ELISA, titrare l'antigene di rivestimento e gli anticorpi di rilevazione per ottenere rapporti segnale-rumore ottimali; la reattività dell'anticorpo con un immunogeno peptide lineare suggerisce l'idoneità sia per formati ELISA diretti che sandwich.

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