Anticorpo policlonale anti-ADK per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P55263

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione dell'ADK

• La chinasi dell'adenosina (ADK) è un enzima espresso ubiquitariamente che catalizza la fosforilazione ATP-dipendente dell'adenosina in corrispondenza della posizione 5′-idrossilica, generando AMP e svolgendo un ruolo centrale nel recupero delle purine e nell'omeostasi cellulare dell'adenosina.
• L'ADK fosforila anche nucleosidi modificati derivati dal turnover dell'RNA, tra cui N6‑metiladenosina (m6A), N6,N6‑dimetiladenosina (m6,6A) e N6‑isopenteniladenosina (i6A), convertendoli in intermedi monofosfato che vengono ulteriormente detossificati dall'enzima MAPDA/ADAL, prevenendo così la disfunzione metabolica causata da nucleosidi modificati citotossici (PubMed:40840445, PubMed:21963049, PubMed:6246102). Riferimenti correlati: PMID:21963049 PMID:40840445 PMID:6246102
• La proteina appartiene alla famiglia delle fosfotransferasi e contiene motivi conservati per il legame dei nucleotidi e dei metalli; la sua struttura cristallina è stata determinata (parola chiave: struttura 3-D) ed è noto che subisce modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione e fosforilazione.
• Gli studi di frazionamento subcellulare localizzano prevalentemente l'ADK nel citoplasma e nel citosol, con un'ulteriore presenza segnalata nel nucleo.
• I profili di espressione tissutale mostrano una distribuzione ampia, con i livelli più elevati di trascritti e proteine nella placenta, nel fegato, nei muscoli e nei reni.
• Lo splicing alternativo genera molteplici varianti trascrizionali e le varianti di sequenza dell'ADK sono state catalogate nei database delle malattie (parola chiave UniProt “Variante associata a malattia”), suggerendo un potenziale ruolo nelle condizioni patologiche.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per generare questo anticorpo policlonale è costituito da una proteina di fusione ricombinante comprendente gli amminoacidi 200‑345 dell'ADK umano (NP_001114.2), che copre una regione C-terminale altamente conservata nell'uomo, nel topo e nel ratto, in accordo con la reattività crociata osservata.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto dell'ADK è di circa 41 kDa; utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati e validare l'anticorpo in lisati di cellule o tessuti che esprimono ADK, ad esempio fegato e reni.
• Nell'immunoistochimica (IHC‑P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), si consiglia di utilizzare metodi di recupero antigenico e di includere controlli come siero preimmune o blocco con peptide per confermare la specificità del segnale.
• Per le applicazioni ELISA, titolare l'anticorpo e testarlo contro l'immunogeno ricombinante o la proteina a lunghezza intera per determinare le concentrazioni di lavoro ottimali.
• Poiché l'ADK è espressa in molti tessuti, si raccomanda di includere controlli positivi e negativi, ad esempio linee cellulari knockout o tessuti con espressione notoriamente bassa, quando si utilizza questo anticorpo in qualsiasi applicazione.

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