Anticorpo monoclonale di coniglio anti-ADRA1A per WB, ELISA - P35348

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di ADRA1A

• ADRA1A (recettore adrenergico alfa-1A) è un recettore accoppiato alle proteine G che media la segnalazione delle catecolamine attraverso le proteine G della famiglia G(q), attivando la via dei secondi messaggeri fosfatidilinositolo-calcio e la protein chinasi C (PubMed:37563160).
  Riferimenti correlati: PMID:37563160
• Si lega ai ligandi catecolaminergici noradrenalina e adrenalina e può inoltre accoppiarsi alla proteina G(14), indicando capacità di segnalazione diversificate (PubMed:18802028, PubMed:37563160, PubMed:7815325).
  Riferimenti correlati: PMID:18802028, PMID:37563160, PMID:7815325
• ADRA1A localizzato nel nucleo forma etero-oligomeri con ADRA1B per regolare la segnalazione ERK stimolata dalla fenilefrina nei miociti cardiaci e, a livello della membrana plasmatica, interagisce con CAVIN4/MURC per regolare l'attivazione di ERK e l'ipertrofia cardiaca (PubMed:18802028, PubMed:22120526, PubMed:24567387).
  Riferimenti correlati: PMID:18802028, PMID:22120526, PMID:24567387
• ADRA1A svolge un ruolo vasopressorio fondamentale nelle arterie di resistenza ed è coinvolto nel mantenimento della normale pressione arteriosa.
• Il recettore è localizzato in molteplici compartimenti subcellulari, tra cui la membrana nucleare, la membrana cellulare, il citoplasma e le caveole, riflettendo la complessità delle sue modalità di segnalazione.
• È espresso nel cuore, nel cervello, nel fegato e nella prostata, con l'isoforma 4 che rappresenta quella più abbondante nella prostata, nel fegato e nel cuore.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la formazione di ponti disolfuro, la glicosilazione, la palmitoilazione e la fosforilazione, che modulano l'attività e il traffico del recettore.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 150-250 di ADRA1A umano (P35348). Questa regione si trova all'interno del terzo loop intracellulare, importante per l'accoppiamento alle proteine G e potenzialmente in grado di influenzare il riconoscimento da parte dell'anticorpo delle conformazioni del recettore. Si consiglia di utilizzare condizioni denaturanti (ad es. WB con SDS-PAGE) per garantire l'accesso agli epitopi lineari.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di ~51 kDa per l'isoforma canonica; tuttavia, lo splicing alternativo e le modificazioni post-traduzionali (glicosilazione, fosforilazione) possono dare origine a bande con peso molecolare maggiore o a più bande. Validare la specificità delle bande utilizzando controlli appropriati (ad es. peptide bloccante, lisati di knockout).
• In ELISA, l'anticorpo può rilevare la proteina denaturata o nativa a seconda delle condizioni di adsorbimento. Ottimizzare il tampone di rivestimento e la presentazione dell'antigene in funzione del formato del test.
• La reattività crociata è stata segnalata per uomo e topo; confermare la reattività nella specie utilizzata per gli esperimenti qualora sia diversa da queste. I livelli di espressione endogena di ADRA1A possono variare a seconda del tessuto; per la rilevazione iniziale si consiglia di prendere in considerazione sistemi di sovraespressione.

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