Anticorpo policlonale anti-ADRA2B per WB ed ELISA - P18089

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione del recettore adrenergico alfa-2B

• Identità proteica: Il recettore adrenergico alfa-2B (gene ADRA2B; alias ADRA2L1, ADRA2RL1, Alpha-2BAR) è un recettore accoppiato a proteine G (GPCR) appartenente alla famiglia simile alla rodopsina. È codificato da un singolo gene umano e condivide l'omologia con altri sottotipi alfa-2.
• Meccanismo di segnalazione principale: In seguito al legame con le catecolamine, l'ADRA2B si accoppia alle proteine G(i/o), inibendo l'attività dell'adenilato ciclasi, stimolando la fosforilazione di ERK1/2 e sopprimendo i canali del calcio voltaggio-dipendenti.
  Riferimenti correlati:
  PMID:11056163 PMID:2164221 PMID:2172775
• Funzioni fisiologiche: Svolge ruoli critici nella regolazione della pressione sanguigna sistemica, nella promozione della lipolisi nel tessuto adiposo e nella modulazione della secrezione di insulina dalle cellule beta pancreatiche.
  Riferimenti correlati:
  PMID:2164221
• Profilo farmacologico: Il rango di potenza dell'agonista è clonidina > noradrenalina > adrenalina = ossimetazolina > dopamina > p-tiramina = fenilefrina > serotonina > p-sinefrina / p-octopamina. Potenza dell'antagonista: yohimbina > clorpromazina > fentolamina > mianserina > spiperone > prazosina > alprenololo > propanololo > pindololo.
  Riferimenti correlati:
  PMID:2164221 PMID:2172775
• Localizzazione subcellulare: Il recettore è localizzato prevalentemente sulla membrana plasmatica, coerentemente con il suo ruolo di recettore di superficie cellulare.
• Caratteristiche strutturali: Contiene sette eliche transmembrana, un ponte disolfuro conservato e un sito di palmitoilazione. Classificato tra i geni correlati all'epilessia (parola chiave UniProt), sebbene i meccanismi patologici diretti richiedano ulteriori studi. Il peso proteico previsto è di circa 50 kDa (UniProt: 49954 Da).

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli aminoacidi N-terminali 1–100 dell'ADRA2B umano. Per i saggi di competizione peptidica, può essere utilizzato un peptide bloccante che copre la stessa regione per confermare la specificità.
• Nel Western blotting, è prevista una banda intorno ai 50 kDa. Utilizzare controlli positivi appropriati (ad es. linee cellulari che esprimono ADRA2B) e verificare la preparazione della membrana per garantire la solubilità del recettore.
• È stato segnalato che l'anticorpo reagisce in modo crociato con l'ADRA2B di topo e ratto; tuttavia, si raccomanda la convalida nel tessuto o nel modello cellulare target a causa della potenziale variazione dell'epitopo dipendente dalla specie.
• Per le applicazioni ELISA, si può considerare l'adsorbimento diretto del peptide sintetico o di preparazioni di membrana contenenti il recettore nativo. Le condizioni di rivestimento ottimali (pH, temperatura) e le fasi di blocco devono essere determinate empiricamente.
• A causa della bassa abbondanza dei GPCR, l'arricchimento delle frazioni di membrana può migliorare la sensibilità di rilevamento nei lisati proteici.

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