Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Aggrecan per WB, IHC, IF, ELISA - P16112

Specifiche e Parametri Nucleari del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Aggrecan

• La proteina core dell'Aggrecan (AGC1, CSPG1, ACAN) è un grande proteoglicano solfato di condroitina e un componente strutturale principale della matrice extracellulare della cartilagine.
• Media la resistenza alle forze compressive nella cartilagine articolare e mantiene l'idratazione dei tessuti e le proprietà di carico.
• L'Aggrecan lega avidamente l'acido ialuronico tramite il suo dominio globulare N-terminale, formando massicci aggregati supramolecolari critici per l'integrità della cartilagine.
• L'Aggrecan è espresso prevalentemente nella cartilagine (PubMed:7524681) ed è stato rilevato anche nei fibroblasti a livello proteico (PubMed:36213313). Riferimenti correlati: PMID:7524681 PMID:36213313
• La proteina è secreta e localizzata principalmente nella matrice extracellulare dei tessuti cartilaginei.
• L'Aggrecan appartiene alla famiglia dei proteoglicani aggrecan/versican e contiene domini simili alle immunoglobuline, domini link e un dominio lectina di tipo C.
• Multiple isoforme sono generate da splicing alternativo, e la proteina core è pesantemente glicosilata con catene laterali di solfato di condroitina e solfato di cheratano.
• Le modifiche post‑traduzionali includono ponti disolfuro, legame del calcio e glicosilazione O‑legata; la proteina matura ha un dominio simile all'EGF e motivi a ripetizione sushi.
• Le mutazioni del gene ACAN umano sono associate a displasie scheletriche e fenotipi di nanismo, sottolineando il suo ruolo essenziale nello sviluppo e nella funzione della cartilagine.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 420–575 dell'aggrecan umano, una regione situata tra i domini G1 e G2; si noti che questo dominio interglobulare può essere suscettibile alla proteolisi nei lisati tissutali.
• Per il Western blot, le grandi dimensioni dell'aggrecan (~261 kDa) e l'estesa glicosilazione possono richiedere SDS‑PAGE a gradiente (es. 4–20%) e tempi di trasferimento prolungati; considerare la deglicosilazione per migliorare la risoluzione delle bande.
• Nell'immunoistochimica (inclusi in paraffina), la recupero dell'antigene con condroitinasi ABC o ialuronidasi può svelare gli epitopi rimuovendo le ingombranti catene laterali di GAG.
• Per l'ELISA, il rivestimento con aggrecan ricombinante o estratti di cartilagine trattati con condroitinasi può migliorare la sensibilità; la natura policlonale dell'anticorpo può fornire un segnale robusto nei saggi a sandwich.

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