Anticorpo policlonale di coniglio anti-AGK per WB, ELISA - Q53H12

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione dell'AGK

• L'AGK è una lipide chinasi mitocondriale che fosforila il monoacilglicerolo e il diacilglicerolo per produrre rispettivamente acido lisofosfatidico (LPA) e acido fosfatidico (PA). Riferimenti correlati: PMID:15939762
• La sovraespressione di AGK aumenta la formazione e la secrezione di LPA, portando alla transattivazione dell'EGFR e all'attivazione della via MAPK, promuovendo così la crescita cellulare. Riferimenti correlati: PMID:15939762
• L'AGK mostra anche attività cerammide chinasi e fosforila preferenzialmente l'1,2-dioleoilglicerolo rispetto al 2,3-dioleoilglicerolo (per similarità).
• Indipendentemente dalla sua funzione chinasica, l'AGK è un componente del complesso TIM22 nella membrana mitocondriale interna. Riferimenti correlati: PMID:28712724 PMID:28712726
• Il complesso TIM22 media l'importazione e l'inserimento di proteine transmembrana a passaggio multiplo, come i trasportatori di metaboliti (es. ANT1/SLC25A4), nella membrana interna, utilizzando il potenziale di membrana come forza motrice. Riferimenti correlati: PMID:28712724
• Localizzazione subcellulare: membrana mitocondriale interna e spazio intermembrana.
• Altamente espresso in muscolo, cuore, rene e cervello.
• Le mutazioni nell'AGK sono associate a malattie tra cui cataratta, cardiomiopatia e disturbi mitocondriali primari (sindrome di Sengers).

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre la regione C-terminale (aa 233–422) dell'AGK umano, che include parte del dominio chinasico. Verificare che l'anticorpo riconosca l'AGK endogeno a lunghezza intera nel proprio sistema.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è di 47 kDa; validare la dimensione della banda in condizioni riducenti in lisati di tessuti o cellule rilevanti.
• L'AGK è una proteina della membrana mitocondriale interna, pertanto assicurare un'efficiente lisi delle membrane mitocondriali (es. utilizzando tampone RIPA con sonicazione) per l'estrazione proteica.
• L'anticorpo mostra reattività crociata con il ratto, consentendo un potenziale utilizzo in modelli di ratto; includere controlli positivi e negativi appropriati.
• Per l'ELISA, ottimizzare la concentrazione dell'antigene di rivestimento e la diluizione dell'anticorpo primario utilizzando AGK ricombinante o estratti cellulari; considerare l'abbinamento con un anticorpo di rilevazione proveniente da una specie ospite diversa.

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