Anticorpo Policlonale Anti-Agrin di Coniglio per WB, IF/ICC, ELISA - O00468

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Agrin

• L'Agrin è un grande proteoglicano solfato di eparano che esiste in molteplici isoforme generate da splicing alternativo; le forme secrete e transmembrana svolgono ruoli distinti nella formazione della giunzione neuromuscolare (NMJ), nella differenziazione sinaptica e nell'outgrowth dei neuriti.
• Alla NMJ, l'agrin è un organizzatore chiave: si lega a LRP4 per attivare il recettore MUSK, innescando la differenziazione postsinaptica e il clustering dei recettori dell'acetilcolina (AChR), un processo essenziale per la funzione sinaptica. Riferimenti correlati: PMID:21969364
• L'Agrin regola positivamente la formazione della cartilagine legandosi all'α-distroglicano e aumentando l'espressione del fattore di trascrizione SOX9, un regolatore critico della differenziazione dei condrociti. Riferimenti correlati: PMID:26290588
• Le isoforme specifiche per i neuroni z+ contengono brevi inserti C-terminali (8-19 aminoacidi) e sono potenti attivatori del clustering di AChR; i fattori di splicing NOVA1 e NOVA2 controllano l'inclusione di questi inserti.
• La proteina è localizzata nella matrice extracellulare, nella membrana basale e nella fessura sinaptica, e una frazione è ancorata alla membrana come proteina transmembrana; è espressa in polmone, rene, muscolo, neuroni e cartilagine articolare.
• Le modifiche post-traduzionali includono una glicosilazione estesa, l'attaccamento di catene glicosaminoglicaniche di solfato di eparano e condroitin solfato, e fosforilazione, che ne modulano la segnalazione e la stabilità.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Dato che l'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 30–350) comune a molteplici isoforme, questo anticorpo policlonale potrebbe rilevare varianti di splicing dell'agrin. Considerare di confermare la specificità dell'isoforma utilizzando controlli specifici per isoforma o analisi di sequenza.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto dell'agrin a lunghezza intera è di ~217 kDa; tuttavia, il processamento proteolitico produce frammenti più piccoli (es. C‑terminale 22 kDa, N‑terminale 110 kDa). Prendere questo in considerazione nell'interpretare i pattern delle bande.
• Nell'IF/ICC, l'agrin si localizza sulla superficie cellulare, nella matrice extracellulare e nelle sinapsi; considerare l'uso di condizioni di permeabilizzazione ottimizzate per proteine associate alla membrana e includere controlli appropriati.
• Questo anticorpo è adatto per applicazioni ELISA; validare linearità e sensibilità con agrin ricombinante o lisati tissutali rilevanti.

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