Anticorpo policlonale anti-AIF per WB, IF, IHC, ELISA - O95831

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'AIF

• L'AIF a lunghezza intera funziona come un'ossidoreduttasi NADH e, dopo stimolo apoptotico, viene rilasciato dai mitocondri al citosol e al nucleo, dove la sua forma solubile AIFsol si lega al DNA e induce parthanatos (frammentazione della cromatina indipendente dalle caspasi) (PMID:20362274, PMID:27178839). Riferimenti correlati: PMID:20362274, PMID:27178839
• L'AIF interagisce con EIF3G per inibire la sintesi proteica e attiva la caspasi-7, amplificando l'apoptosi (PMID:17094969). Riferimenti correlati: PMID:17094969
• L'AIF svolge un ruolo critico nella morte cellulare piconotica indipendente dalle caspasi mediata da perossido di idrogeno (PMID:19418225). Riferimenti correlati: PMID:19418225
• L'AIF regola anche la biogenesi della catena respiratoria mediando l'importo mitocondriale di CHCHD4 (PMID:26004228). Riferimenti correlati: PMID:26004228
• A livello subcellulare, l'AIF risiede principalmente nello spazio intermembrana e nella membrana interna dei mitocondri; si transloca al citosol e al nucleo durante l'apoptosi.
• L'AIF è espresso ubiquitariamente nei tessuti umani (PMID:16644725), con rilevazione confermata nel muscolo, nei fibroblasti della pelle (PMID:23217327) e negli osteoblasti (PMID:28842795). L'isoforma 5 è frequentemente down-regolata nei tumori. Riferimenti correlati: PMID:16644725, PMID:23217327, PMID:28842795

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli aminoacidi 334-613 dell'AIF umano, coprendo il dominio C-terminale; questo potrebbe consentire il riconoscimento delle isoforme AIF contenenti questa regione.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda predominante intorno a 67 kDa per la proteina AIF a lunghezza intera nei campioni umani, murini e di ratto.
• Considerare la titolazione dell'anticorpo per prestazioni ottimali in immunofluorescenza (IF/ICC) e immunochimica (IHC-P); eseguire un appropriato recupero dell'antigene per IHC-P.
• Validare la specificità dell'anticorpo utilizzando controlli positivi (es. cellule HeLa) e modelli knockout/knockdown ove possibile.
• Si noti che l'AIF si transloca dai mitocondri al nucleo dopo l'induzione dell'apoptosi; questo può essere osservato negli esperimenti IF dopo il trattamento con stimoli apoptotici.

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