Anticorpo policlonale anti-AIRE per WB, IF/ICC, ELISA - O43918

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di AIRE

• AIRE (regolatore dell'autoimmunità), noto anche come proteina APECED, è un fattore di trascrizione essenziale per l'instaurazione dell'autotolleranza immunitaria. Le mutazioni nel gene AIRE causano la poliendocrinopatia autoimmune con candidosi e distrofia ectodermica (APECED).
• AIRE promuove l'autotolleranza nel timo regolando l'espressione degli antigeni tessuto-specifici (TRA) nelle cellule epiteliali timiche midollari (mTEC). Riferimenti correlati: PMID:26084028
• Si lega ai dinucleotidi G nelle sequenze di DNA ricche in A/T, interagisce con i nucleosomi e riconosce selettivamente l'istone H3 privo di metilazione in Lys-4, di fosforilazione in Thr-3 e di metilazione in Arg-2, agendo quindi come sensore epigenetico.
• AIRE induce l'espressione di migliaia di TRA, che vengono presentati sulle molecole MHC-I e MHC-II ai linfociti T in sviluppo, garantendo la tolleranza centrale. Riferimenti correlati: PMID:26084028
• Negli organi linfoidi secondari, una popolazione distinta di cellule extratimiche esprimenti AIRE di derivazione midollare (eTAC) contribuisce alla tolleranza periferica inducendo l'inattivazione funzionale dei linfociti T CD4+. Riferimenti correlati: PMID:23993652
• La localizzazione subcellulare è principalmente nucleare, con una presenza aggiuntiva nel citoplasma.
• AIRE contiene domini zinc finger, è soggetto a splicing alternativo (le isoforme 2 e 3 sono espresse meno frequentemente) ed è regolato dalla fosforilazione. Sono state identificate numerose varianti associate a malattie.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno ha come target la regione N-terminale (amminoacidi 30–130); verificare l'accessibilità dell'epitopo e considerare eventuali effetti di blocco se il test coinvolge questo dominio.
• Per il Western blot, AIRE endogeno migra a ~58 kDa; utilizzare controlli positivi derivati dal timo o da mTEC e includere la validazione dell'espressione specifica del tessuto.
• Nelle applicazioni IF/ICC, ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione per rilevare sia le frazioni nucleari sia quelle citoplasmatiche. Validare la colorazione su tessuto timico o su linee cellulari pertinenti.
• Per l'ELISA, questo anticorpo policlonale può essere utilizzato per la cattura o la rilevazione; l'abbinamento con un anticorpo monoclonale può migliorare la specificità nei formati sandwich.

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