Anti-AKT1 (fosfo T308) mAb di coniglio per WB, ELISA - P31749

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di AKT1

• AKT1 è un membro della famiglia delle chinasi serina/treonina AKT, che include anche AKT2 e AKT3, e regola processi cellulari critici come il metabolismo, la proliferazione, la sopravvivenza, la crescita e l'angiogenesi (PubMed:11882383, PubMed:15526160, PubMed:15861136). Riferimenti correlati: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• AKT1 promuove la sopravvivenza cellulare fosforilando MAP3K5 a Ser-83, che inibisce l'attività chinasica di MAP3K5 in risposta allo stress ossidativo, prevenendo così l'apoptosi (PubMed:11154276). Riferimenti correlati: PMID:11154276
• Nella segnalazione dell'insulina, AKT1 media la sintesi proteica e la crescita cellulare fosforilando TSC2 a Ser-939 e Thr-1462, portando all'attivazione della via mTORC1 (PubMed:12150915, PubMed:12172553). Riferimenti correlati: PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT1 fosforila i fattori di trascrizione FOXO, incluso FOXO1 a Thr-24, Ser-256 e Ser-319, inducendo il legame con le proteine 14-3-3 e la ritenzione citoplasmatica, inibendo così le loro funzioni pro-apoptotiche (PubMed:10358075). Riferimenti correlati: PMID:10358075
• La proteina si localizza nel citoplasma, nucleo, membrana cellulare e spazio intermembrana mitocondriale, riflettendo i suoi molteplici ruoli regolatori.
• AKT1 è espresso in tutti i tipi di cellule umane, con un'espressione aumentata osservata nel cancro alla prostata e una fosforilazione elevata di Tyr-176 negli stadi progressivi del cancro al seno.
• La fosforilazione a Thr308 è un evento critico per l'attivazione della chinasi AKT1 e serve come marcatore chiave dell'attività della via PI3K nelle applicazioni di ricerca e diagnostiche.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico corrispondente ai residui attorno a Thr308 di AKT1 umana; validare la specificità confrontando i segnali con e senza trattamento con fosfatasi.
• Per il Western blot, è prevista una banda principale a ~56 kDa; utilizzare inibitori fresh di proteasi e fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare la fosforilazione.
• Considerare l'uso dell'anticorpo in ELISA per quantificare i livelli di fosforilazione di AKT1 Thr308; l'abbinamento con un anticorpo AKT1 totale consente la normalizzazione.
• Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo per ogni applicazione e linea cellulare per ottenere il miglior rapporto segnale/rumore.

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