Anticorpo Policlonale Anti-AKT1 per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P31749

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'AKT1

• AKT1 è una chinasi proteica serina/treonina, nota anche come Protein chinasi B (PKB), appartenente alla famiglia delle chinasi AKT (AKT1, AKT2, AKT3). Regola processi diversi tra cui metabolismo, proliferazione, sopravvivenza cellulare, crescita e angiogenesi. Riferimenti correlati: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136
• AKT1 media gli effetti di fattori di crescita come l'insulina, IGF-1 ed EGF a valle del PI3K, controllando l'assorbimento di glucosio tramite il traslocazione di GLUT4 e la sintesi del glicogeno inibendo GSK3. Riferimenti correlati: PMID:11994271
• Promuove la sopravvivenza cellulare fosforilando e inibendo fattori pro-apoptotici come BAD e MAP3K5, e attivando vie di sopravvivenza tra cui NF-κB e CREB1. Riferimenti correlati: PMID:11154276 PMID:9829964
• AKT1 si localizza nel citoplasma, nel nucleo, nella membrana cellulare e nello spazio intermembrana mitocondriale, riflettendo il suo coinvolgimento in più compartimenti di segnalazione.
• AKT1 subisce chiave modificazioni post-traduzionali come la fosforilazione e l'acetilazione, ed è considerato un proto-oncogene. La sua espressione è spesso sovraregolata nei tumori, con la forma fosforilata in Tyr-176 che aumenta durante la progressione del cancro al seno.
• Espressa ubiquitariamente nelle cellule umane, AKT1 svolge un ruolo critico nella crescita e differenziazione cellulare. Si osserva una sovraregolazione tessuto-specifica nelle neoplasie della prostata e della mammella.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide all'interno della regione C-terminale (aa 350-480) dell'AKT1 umano, che può conferire specificità per isoforma; tuttavia, validare con proteine ricombinanti o siRNA se la reattività crociata con AKT2 o AKT3 è una preoccupazione.
• Per il Western blotting, le condizioni denaturanti e riducenti rivelano tipicamente una banda a ~56 kDa. Utilizzare controlli positivi appropriati (es. lisati di HeLa, MCF-7) e considerare che la mobilità osservata può riflettere lo stato di fosforilazione.
• I protocolli IF/ICC e IHC-P possono richiedere rispettivamente la permeabilizzazione e il recupero dell'antigene. Ottimizzare i metodi di fissazione (es. PFA al 4% vs. metanolo) per il tipo di campione e includere passaggi di blocco per minimizzare il background.
• Le applicazioni ELISA possono essere configurate utilizzando formati indiretti o a sandwich; l'abbinamento con un anticorpo di cattura adatto può migliorare la sensibilità. Titolare l'anticorpo e utilizzare un tampone di rivestimento coerente.
• È riportata la reattività crociata con AKT1 di mouse e ratto, ma verificare l'omologia della sequenza specifica della specie nella regione dell'immunogeno se si utilizzano campioni non umani.

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