Anticorpo Policlonale Anti-AKT1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P31749

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di AKT1

• AKT1 (PKB/PKB alfa/RAC-PK-alfa) è una serina/treonina-proteina chinasi e una delle tre isoforme AKT strettamente correlate (AKT1, AKT2, AKT3) che regolano processi cellulari fondamentali tra cui metabolismo, proliferazione, sopravvivenza, crescita e angiogenesi. Riferimenti correlati: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• AKT1 fosforila un ampio spettro di substrati per controllare la segnalazione insulinica, il metabolismo del glucosio e la crescita cellulare. Fosforila TSC2, attivando mTORC1 per promuovere la sintesi proteica e la crescita cellulare, e fosforila i fattori di trascrizione FOXO, determinandone il sequestro citoplasmatico e l'inibizione dell'espressione genica pro-apoptotica. Riferimenti correlati: PMID:12150915, PMID:12172553, PMID:10358075, PMID:21432781
• AKT1 è fondamentale per la sopravvivenza cellulare: fosforila MAP3K5/ASK1 a Ser-83 per inibire l'apoptosi indotta da stress ossidativo e fosforila BAD per bloccare la sua funzione pro-apoptotica. Attiva anche CREB1, potenziando la trascrizione di geni anti-apoptotici come BCL2 e MCL1. Riferimenti correlati: PMID:11154276, PMID:10926925, PMID:9829964
• AKT1 svolge un ruolo chiave nell'assorbimento del glucosio mediato dall'insulina promuovendo la traslocazione del trasportatore SLC2A4/GLUT4 alla membrana plasmatica e inibendo GSK3, stimolando così la sintesi del glicogeno.
• AKT1 si localizza nel citoplasma, nel nucleo, nella membrana cellulare e nello spazio intermembrana mitocondriale, consentendole di modulare la segnalazione in più siti subcellulari.
• Esressa in modo ubiquitario nei tessuti umani, i livelli proteici di AKT1 aumentano dallo stato normale a quello maligno nel cancro alla prostata, e la sua forma fosforilata in Tyr-176 è elevata durante la progressione del cancro al seno.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico derivato dagli amminoacidi 100-200, una regione centrale che può garantire una buona accessibilità. Considerare questo anticorpo per rilevare la proteina AKT1 totale in vari lisati.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di circa 56 kDa. È attesa una banda di queste dimensioni in campioni umani, di topo e di ratto data la reattività crociata riportata. Verificare il marcatore di peso molecolare e utilizzare controlli di caricamento appropriati.
• Questo anticorpo policlonale è adatto per l'immunoistochimica (IHC-P) e l'immunofluorescenza (IF/ICC). Ottimizzare i metodi di recupero dell'antigene per tessuti inclusi in paraffina e includere controlli negativi appropriati per valutare la specificità.
• Per applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento. Validare la concentrazione di lavoro ottimale empiricamente utilizzando il peptide immunogeno come controllo positivo.
• Poiché l'attivazione di AKT1 dipende dallo stato di fosforilazione (es. Thr-308, Ser-473), considerare di combinarlo con anticorpi specifici per l'attivazione per studi di segnalazione.
• A causa della somiglianza di sequenza tra le isoforme AKT, verificare la specificità dell'isoforma nel proprio sistema sperimentale.

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